[發明專利]一種山藥珠芽的組培方法

有效

• 申請號: 201210351638.0
• 申請日: 2012-09-20
• 公開（公告）號: CN102823501A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 彭江晨
• 申請（專利權）人: 溧陽市天目湖保健品有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京天翼專利代理有限責任公司 32112
• 代理人: 黃明哲

技術領域

本發明屬于一種植物的組培技術，特別地涉及山藥珠芽的組培技術。

背景技術

山藥（Dioscorea?opposita?Thunb.），別名薯蕷、懷山藥，為薯蕷科多年生纏繞草本植物。其根莖經去外皮干燥后可入藥，具補脾胃，補肺益陰，固腎澀精等作用，主治體倦，虛勞咳嗽，肺虛咳喘，腎虛遺精等癥，除藥用外還可食用。

山藥的傳統繁殖方法主要有兩種，一種是蘆頭繁殖法，一種是珠芽繁殖法。蘆頭繁殖法主要是指選取蘆頭（脖頸短）、粗壯、無病蟲害、芽頭飽滿的山藥，將上部7-10厘米長折下，置于室內通風處晾5-7天，貯藏于室內或窖內越冬。翌年4月取出用于種植。珠芽繁殖法是指選取無病蟲害、無損傷、個頭較大的珠芽。用濕沙埋在室內或窖內過冬，防止受凍或受熱，翌年4月取出用于種植。

相對于蘆頭繁殖來說，珠芽繁殖的成活率更高，而且長期使用蘆頭繁殖存在嚴重的退化現象，另外珠芽的體積小，便于保存和運輸，因此從上述角度來說珠芽繁殖要優于蘆頭繁殖，但是珠芽繁殖也有其自身的缺陷，那就是珠芽比蘆頭更加嬌嫩，需要更嚴格的貯存條件。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了一種山藥珠芽的組培方法，通過這種方法能讓珠芽在短時間內快速大量地增殖，從而大大降低需要貯存的珠芽數量，同時也大大提高了珠芽繁殖的范圍。

本發明所述的山藥珠芽的組培方法如下：

1、外植物體取材和消毒。將從山藥上取下的珠芽切成長寬分別為0.5-1厘米的方塊狀，用自來水沖洗干凈后用洗衣粉溶液浸泡15分鐘，再用自來水沖洗干凈。將珠芽塊置于超凈工作臺上，先用75%酒精消毒30秒，然后用0.1%的升汞溶液浸泡5分鐘，隨后用無菌水沖洗3-4次，置于無菌的干凈培養皿中備用。

2、培養基的配置和接種。配置兩種培養基，一種為誘導培養基，一種為增殖培養基，誘導培養基的配方為：在MS培養基中加入6-芐氨基腺嘌呤3.0mg/L，蔗糖30g/L，瓊脂8g/L，pH6.0。增殖培養基的配方為：在MS培養基中加入6-芐氨基腺嘌呤5.0mg/L，萘乙酸0.3ml/L，蔗糖30g/L，瓊脂8g/L，pH6.0。在超凈臺中將珠芽芽體朝上接種于誘導培養基上。培養溫度為25±1℃，光照強度1200lx，光照時間10h/d。

3、叢生珠芽的增殖。在山藥珠芽在誘導培養基上已經長出叢生珠芽之后，將叢生珠芽從主體上切下，將其轉移到增值培養基上進行繼代擴繁。

4、馴化移栽。將生長出的珠芽移植至通風、明亮的煉苗室中，揭開培養皿蓋子，將珠芽取出，洗凈粘在其上的培養基，用0.1%的高錳酸鉀溶液浸泡10-15分鐘，再轉移到已消毒的苔蘚基質上。移栽后適當澆水，保持光照在1500-2000lx之間，溫度為25-30℃，光照時間12h/d，空氣濕度大于90%。

其中步驟2中提到的MS培養基的配方是本領域技術人員所共知的，其配方為：

工作液濃度單位mg/L

大量元素：NH₄NO₃?1650；KNO₃?1900；CaCl₂·2H₂O?440；MgSO₄·7H₂O?370；KH₂PO₄170；

微量元素：KI?0.83；H₃BO₃?6.2；MnSO₄·4H₂O?22.3；ZnSO₄·7H₂O?8.6；Na₂MnO₄·2H₂O0.25；CuSO₄·5H₂O?0.025；CoCl₂·6H₂O?0.025；

鐵鹽：FeSO₄·7H₂O?27.8；Na₂-EDTA·2H₂O?37.3

有機物質：肌醇100；煙酸0.5；鹽酸吡哆醇（維生素B6）0.5；鹽酸硫胺素（維生素B1）0.1；甘氨酸2.0。

其中山藥珠芽在誘導培養基上長出叢生珠芽大約需要13-15天，在增殖培養基上，大約10天左右又可生產新的叢生珠芽，馴化移栽的時間以5-7天為宜。