[發明專利]一種從白亮獨活中提取獨活素的方法

無效

• 申請號: 201210350182.6
• 申請日: 2012-09-20
• 公開（公告）號: CN102838611A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 劉東鋒
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于中藥化學領域，涉及一種從白亮獨活中提取獨活素的方法。

背景技術

獨活素是一種呋喃香豆素類化合物，為淺黃色細針晶，mp.108-109℃，分子式為C₁₆H₁₄O₅，分子量為286.28，廣泛分布于蕓香科和傘形科多種植物中。近代研究表明，獨活素具有抗炎作用；大鼠給藥1-2mg/kg時，有刺激呼吸的作用；具有增加動脈壓和心肌收縮力的作用；另外，對大鼠離體腸有解痙活性。Appendino?G等研究表明獨活素還具有細胞毒性，且進隊生長細胞有凋亡作用，獨活素通過下調細胞周期進程，使細胞停于有絲分裂G₂/M期，致DNA片段化和凋亡。

目前從天然植物中提取獨活素的方法報道較少，有報道通過半合成制備得到獨活素，即由13-O-Glucosyl-heraclenol水解生成Heraclenol，再將其鄰二醇脫水形成環氧丙烷得到獨活素，或將異戊稀醇通過Sharpless不對稱環氧化反應，合成支鏈結構，再與Imperatorin水解后得到的母核相接，得到獨活素。所得獨活素其生物活性受到限制，收率低、純度低。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供一種從天然植物白亮獨活中提取獨活素的方法，該方法制備量大、樣品損失少、產品純度高，易于規?；?。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種從白亮獨活中提取獨活素的方法，其特征在于包括以下步驟：

A.將白亮獨活藥材粉碎，用5-8倍體積量的甲醇作為提取溶媒進行超聲提取，提取2-6次，提取液合并，旋轉蒸發濃縮得到浸膏；

B.將上述浸膏通過乙酸乙酯-水雙相分散，取乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯；

C.將上述所得萃取濃縮物采用高速逆流色譜法進行分離純化，根據檢測器譜圖接收目標流分，并用制備液相色譜對流分進一步純化，得到獨活素。

所述步驟A中超聲提取時間每次為20-40min。

所述步驟C中高速逆流色譜溶劑系統為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，體積比為（3-7）：（3-5）：（4-8）：（2-5）。

所述步驟C中制備液相色譜分離條件為：流動相為甲醇-水（90:10），流速為10-20ml/min。

本發明的有益效果在于：采用乙酸乙酯-水雙相溶劑系統萃取，提高了白亮獨活中香豆素的保留率，采用高速逆流色譜和制備液相色譜結合進行分離純化，分離效果好，溶劑消耗少，可連續制備大量獨活素單體產品，具有較高的經濟價值。

具體實施方式：

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

將白亮獨活藥材粉碎加5倍體積量的甲醇超聲提取3次，每次30min，合并提取液，旋轉蒸發濃縮得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水（1:1）雙相萃取，取上層乙酸乙酯有機相，減壓濃縮成浸膏。將體積比5:4:7:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振蕩搖勻，使兩相達到平衡，靜置分層后分離，下相為流動相，上相為固定相，分別對其超聲脫氣40min后冷卻備用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等體積的上相和下相溶劑中，過濾，得樣品溶液；將配制好的固定相以4ml/min的流速充滿高速逆流色譜儀的螺旋管中，開啟制備型高速逆流色譜儀，調整主機轉速為800rpm，以2ml/min的流速將流動相泵入柱內，待柱內溶劑體系建立動態平衡后，取樣品溶液由進樣閥進樣，然后根據紫外檢測譜圖收集獨活素流分，減壓濃縮后再應用高效液相色譜分離純化，流動相為甲醇-水（90:10），流速15ml/min，根據檢測器譜圖收集目標成分，減壓濃縮得到純度98.4%的獨活素。

實施例2：