[發明專利]一種抗體及其應用、制備方法

無效

• 申請號: 201210347802.0
• 申請日: 2012-09-19
• 公開（公告）號: CN102924599A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 高向東;趙虎;賈國棟;姚文兵;郭薇
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N5/20;A61K39/395;A61P29/00;A61P19/02;A61P1/00;A61P37/02;A61P19/04;A61P25/00;A61P17/06;A61P11/06;G01N33/577;C12R1/91
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發明領域

本發明涉及人白介素-23受體胞外區結構域(hIL-23R-CHR)的特異性單克隆抗體及其用途，本發明還涉及產生上述單克隆抗體的雜交瘤細胞株9H3保藏號：CCTCC?C201240。

背景技術

免疫系統的功能在于保護個體免受細菌、多細胞有機體和病毒等感染原及癌癥的損害。這種系統包括若干類型的淋巴細胞和骨髓細胞：單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞(DC)、嗜酸性粒細胞、T細胞、B細胞及中性粒細胞。這些淋巴細胞和髓系細胞通常產生稱為細胞因子的信號蛋白(肽)。免疫反應包括炎癥，即，免疫細胞在全身或在身體特定部位積聚。當感染原或外來物質入侵時，刺激免疫細胞分泌細胞因子，細胞因子繼而調節免疫細胞的增殖、發育、分化或遷移。當免疫反應涉及過量的炎癥因子時，它可能產生病理后果。

hIL-23與hIL-23R的關系

人白介素-12(hIL-12)是由p35和p40兩個亞基組成的異二聚體細胞因子，主要由單核巨噬細胞(MΦ)和樹突狀細胞(DC)產生。hIL-12具有促進分化的CD4+T輔助細胞1(Th1)增殖，促進細胞毒性T細胞(CTL)的形成，提高NK細胞的細胞毒性，誘導T細胞和NK細胞產生INF-γ、TNF-α和IL-6等細胞因子，這些免疫細胞因子的過表達跟銀屑病、克羅恩病(CD)、炎癥性腸病(IBD)和風濕性關節炎(RA)等自身免疫疾病密切相關。而人白介素23(hIL-23)則是近期發現的類似于hIL-12的促炎癥細胞因子，屬于IL-12家族，由單獨的p19亞單位和hIL-12的p40亞單位組成。hIL-23主要由活化的DCs、MΦ以及記憶性T細胞和NK細胞分泌。hIL-23在Th0向Th17細胞分化的起始及維持Th17分化、發育中起關鍵性作用。hIL-23能促進T細胞尤其是CD4+T細胞增殖，促進T細胞、抗原遞呈細胞(APC)產生IFN-γ與IL-12，并對DC的共刺激功能起調節作用。近來的研究揭示hIL-23在銀屑病、CD、IBD和RA等自身免疫性疾病發病機制中較hIL-12處于更重要的地位。因此，hIL-23和hIL-12拮抗劑研究與開發已成為相關疾病新藥創制的焦點。

hIL-23的受體是由hIL-12β1與hIL-23R共同組成的受體復合物。除了hIL-12R的共有亞基hIL-12Rβ1，p19亞基特異性受體hIL-23R是造血因子受體超家族的一個新成員。hIL-23R包含一個細胞外區域、一個單跨膜區域和一個有252個氨基酸的胞質區域。其胞外區不同于其他造血因子受體超家族成員的三個膜纖維蛋白連接，而是由一個信號序列、一個N端免疫球蛋白樣結構域和2個細胞因子受體區域組成。hIL-23與hIL-12共用Jak-stat信號分子，如Jak2、Tyk2、STAT1、STAT3、STAT4和STAT5，而hIL-23R主要是運用Jak2和STAT3信號分子。

hIL-23R與IL-17的關系

IL-17通常指的是IL-17A，屬于IL-17家族，主要由Th17產生。Th17是最近研究發現的一類不同于Th1和Th2的CD4+T細胞亞群。目前Th17的調控機制仍不十分清楚，對于Th17分化過程的研究提出兩種模型：一種認為，Th1和Th17的早期分化階段是一致的，后期分化不同是由于hIL-12和hIL-23選擇性的作用于同時表達hIL-12R/hIL-23R的“前Th1細胞”；另一個模型認為，Th1和Th17代表的是完全不同的細胞系，從一開始的分化過程就不同。后來證實的確存在與Th1無關的Th17分化途徑。TGF-β和IL-6是Th17分化的啟動者，hIL-23是Th17的活化和維持者。hIL-23在Th17細胞分化過程中具體的作用機制被認為與STAT-3有關，因為hIL-23可以介導STAT-3的磷酸化過程，使STAT-3激活從而促進IL-17的分泌。故hIL-23R對Th17細胞亞群來說是一個關鍵的作用因子。hIL23/hIL23R-Th17/IL17軸在自身免疫性疾病中的致病性也已被證實。減少被鼠白介素-23(mIL-23)刺激的IL-17的產生就可以減少EAE在小鼠模型中的發生，同時運用IL-17的抗體可以提供部分的保護作用。更進一步的研究表明，重組基因mIL-23p19能夠加劇小鼠的結腸炎，相反抗mIL-23p19抗體的治療就能夠改善EAE。因此Th17細胞在炎癥免疫性疾病中具有重要作用，可以作為一個新的藥物作用靶分子。

hIL-23R與自身免疫性疾病的關系