[發明專利]豬小腸綜合提取肝素鈉的工藝

有效

• 申請號: 201210347347.4
• 申請日: 2012-09-19
• 公開（公告）號: CN103183746A
• 公開（公告）日: 2013-07-03
• 發明（設計）人: 花瑞華;潘為群;潘為中
• 申請（專利權）人: 杭州龍揚生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

1.?一種豬小腸綜合提取肝素鈉的工藝，其特征在于：所述的工藝步驟如下：

（1）前處理：將豬小腸放入刮腸機中，獲得豬小腸粘膜漿液待用，剩余腸衣、腸皮，腸皮單獨用于提取肝素鈉；

（2）腸衣泡把：將腸衣繞把形成腸衣把，接著將腸衣把放入浸泡液中第一次浸泡4-5小時，取出瀝干，使用腸衣專用鹽對腸衣把腌制處理，之后，將腸衣把放入浸泡液中二次浸泡6-8小時，第一次浸泡的浸泡液為飽和氯化鈉溶液，二次浸泡的浸泡液為鹽度15°-18°的氯化鈉溶液；第一次浸泡及二次浸泡時，每1000L浸泡液均浸泡160±5把腸衣把，收集第一次浸泡的浸出液待用，收集二次浸泡后的浸出液作為下一次提取時腸衣把第一次浸泡的浸泡液；

（3）酶解：將豬小腸粘膜漿液加入酶解罐，豬小腸粘膜漿液為豬小腸粘膜：水=1:?2.5-4的重量比的混合物，向酶解罐中加入步驟（2）收集的第一次浸泡的浸出液調節酶解罐中料液的鹽度至5±0.5°，控制料液的pH在8.5±0.5；接著按每1000L料液加1.2±0.4kg的酶量向酶解罐內加入2709堿性蛋白酶，控制料液溫度在53±3℃，鹽度4.2±0.2°，pH?7.0±0.5保持3±0.5小時；最后升溫至85-88℃，保持20-25min得酶解液，過濾去殘渣；

（4）吸附：將酶解液輸入吸附罐，降溫至57±3℃，加水調節鹽度至3.0±0.5°，控制pH?7.0-7.5，按每1000L酶解液加3-8kg的樹脂量，向吸附罐內加入羅門哈斯FPA98CL型樹脂，攪拌吸附6-8小時后，收集樹脂；

（5）洗滌：將收集的樹脂用水洗滌至pH為中性，再將樹脂放入鹽度4±1°、溫度55-60℃的氯化鈉溶液，攪拌至少1小時進行洗滌，其中，樹脂：氯化鈉溶液=1:1.3-1.7（w/v）；

（6）洗脫：將步驟（5）洗滌后的樹脂倒入洗脫罐中進行兩次洗脫，其中，第一次洗脫為：將樹脂加入到鹽度為21±1°、溫度55-60℃的氯化鈉溶液中攪拌至少3小時，樹脂：氯化鈉溶液=1:1-1.4（w/v）；第二次洗脫為：將第一次洗脫后的樹脂加入到鹽度為21±1°、溫度55-60℃的氯化鈉溶液中攪拌至少3小時，樹脂：氯化鈉溶液=1:0.8-1.2（w/v）；合并兩次收集的洗脫液；

（7）沉淀：將步驟（6）收集到的洗脫液倒入沉淀罐中，攪拌條件下向沉淀罐中加入酒精度85±5°的酒精，酒精用量以實測沉淀罐中混合液的酒精度到45°-60°為準，靜置沉淀15小時以上，收集沉淀物；

（8）干燥：步驟（7）得到的沉淀物加入酒精度85°以上的酒精進行脫水1-3小時，濾干后做烘干處理即得肝素鈉產品。

2.根據權利要求1所述的豬小腸綜合提取肝素鈉的工藝，其特征在于：步驟（2）中腸衣繞把具體為：將腸衣按1±0.2米的長度來回折疊，疊完后在中間捆扎形成腸衣把，每100±1米腸衣合成一把腸衣把；腸衣把兩次浸泡過程中，均用氣泵向浸泡液中充空氣使浸泡液上下翻滾流動。

3.根據權利要求2所述的豬小腸綜合提取肝素鈉的工藝，其特征在于：步驟（2）中腌制處理具體為：第一步抹鹽：將腸衣專用鹽均勻涂抹在腸衣表面，腸衣專用鹽的用量為每1把腸衣把用鹽1-1.2kg；第一步抹鹽完成后腌制48小時以上，接著進行第二步復鹽：將腸衣專用鹽再次均勻涂抹在腸衣表面，腸衣專用鹽的用量為每1把腸衣把用鹽0.5-0.6kg；第二步復鹽完成后腌制12-14小時。

4.根據權利要求1或2或3所述的豬小腸綜合提取肝素鈉的工藝，其特征在于：步驟（3）處理得到的酶解液在6000-8000轉/分的轉速下，離心處理20-40min后，再進入下一步的吸附。

5.根據權利要求1所述的豬小腸綜合提取肝素鈉的工藝，其特征在于：將步驟（4）收集樹脂后剩余的料液重新輸送至吸附罐，控制溫度在57±3℃，pH?7.0-7.5，按每1000L料液加2-3kg的樹脂量向吸附罐內加入羅門哈斯FPA98CL型樹脂再次吸附6-8小時后，收集樹脂，然后與步驟（4）收集的樹脂合并后，進入下一步的洗滌步驟。