[發明專利]一種龍須菜瓊膠寡糖及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201210347105.5
• 申請日: 2012-09-18
• 公開（公告）號: CN102827899A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 曾潤穎;產竹華;萬瑋;高超
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;A23L1/29;A61K8/60;A61K31/702;A61P17/16;A61P39/06;A61Q17/00;C12R1/01
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森

技術領域

本發明涉及一種寡糖，涉及一種龍須菜瓊膠寡糖及其制備方法，該寡糖利用菌株與龍須菜的共培養制備而成，具有抗氧化、防紫外線等生理活性。

背景技術

寡糖是指由2～20個相同或不同單糖構成的直鏈或支鏈低度聚合糖類物質，又稱低聚糖，包括普通寡糖和功能性寡糖兩大類。普通寡糖中有人們熟悉的蔗糖、麥芽糖、乳糖等，這些糖可以被機體消化吸收，對腸道有益菌并無生長促進作用，另一類是功能性寡糖，例如果寡糖、低聚木糖、大豆低聚糖、殼寡糖、瓊膠寡糖、褐藻膠寡糖等，它們本身不能被機體消化吸收，但具有多種生理活性，在食品、農業等領域有著廣闊的市場空間。

海藻寡糖近年來被發現具有重要的生理活性，其中來自江籬、石花菜等紅藻的瓊膠寡糖研究得較為廣泛。例如中國專利CN200410024380.9中所主張的瓊膠寡糖具有益生元的作用，中國專利CN03138973.2專利中所主張的瓊膠低聚糖混合物可用作制備降血糖的藥物或者食品添加劑，中國專利CN1171592C專利中所主張的瓊膠低聚寡糖具有成纖維細胞生長促進作用以及紫外線氧化損傷保護作用等。

但至今瓊膠寡糖的應用仍然較少，影響其應用開發的瓶頸因素主要在于制備方法。目前瓊膠寡糖的制備過程都是先從江籬、石花菜等紅藻中提取出瓊膠，然后再用化學法或酶法將瓊膠降解為分子量更小的寡糖。例如中國專利CN01115094.7，CN021132573.1，CN03138971.6等分別主張采用不同的化學方法降解瓊膠獲取低聚糖；中國專利CN03112515.8，CN03112518.2，CN200310114439.9等主張利用天然菌或者基因工程菌所獲得的瓊膠酶制劑進行瓊膠低聚糖的制備等。但是無論是化學法還是酶解法都存在較為嚴重的缺點，包括：①這些方法都只能作用于瓊膠等海藻多糖，而從海藻中提取海藻多糖需經過堿、酸反復處理和反復的水洗，造成了嚴重的污染和水資源的消耗；②酶解法需先經過酶制劑的大規模制備，然后才能應用于多糖的降解。但是酶制劑的制備對儀器設備的要求高，提高了生產成本，并使整體工藝復雜化；③目前仍然缺乏高效的瓊脂酶，導致瓊膠寡糖無法得到大規模生產和應用；④化學法生產的瓊膠寡糖分子量不均一，產品質量不穩定，難以進行大規模生產。目前僅有美國使用大西洋假單胞菌的瓊膠酶制備瓊膠低聚糖的產品，但價格昂貴，無法滿足開發和生產的要求。

我國海藻養殖規模龐大，本發明所涉及的龍須菜是一種江蘺屬海藻，也是我國主要的海藻養殖品種之一，其經濟價值主要來自于提取瓊膠和作為鮑魚飼料，處于低值化利用階段。本發明采用菌株與龍須菜共培養的方法，利用微生物所產的酶系直接降解龍須菜得到瓊膠寡糖，可解決限制瓊膠寡糖應用開發中的上述問題，實現龍須菜的高值化利用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種龍須菜瓊膠寡糖及其制備方法。

本發明的第2目的在于提供龍須菜瓊膠寡糖在制備抗氧化、抗紫外線保健品和化妝品中的應用。

所述龍須菜瓊膠寡糖是利用太平洋火色桿菌（Flammeovirga?Pacifica）H2與龍須菜共培養，利用菌株所產的酶系直接降解龍須菜獲得聚合度為4～8的瓊膠寡糖，具有抗氧化、吸收紫外線等生理活性。

所述太平洋火色桿菌（Flammeovirga?Pacifica）H2由本發明人自行分離得到，并于2012年6月13日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC?NO:M2012229，地址為中國武漢大學（郵編430072）。樣品的來源為太平洋深海5378m深處的泥樣（E157°24′31″，N19°30′30）。菌株的篩選分離和培養方法為：將深海沉積物2g放入30mL含1%經60～80目過篩的龍須菜粉末的2216E液體培養基中，于4℃中富集。然后將富集液稀釋1000倍，涂布于含1%經60～80目過篩的龍須菜粉末的2216E平板上，于16℃培養。將得到的菌株進一步純化保種，并進行鑒定。

本發明所述龍須菜瓊膠寡糖的制備方法如下：

1）將菌株太平洋火色桿菌（Flammeovirga?Pacifica）H2用活化培養基平板進行活化后，接種于種子培養基中，振蕩培養得發酵液；

2）將步驟1）中得到的發酵液接種入產糖培養基中，繼續振蕩發酵培養后離心，收集上清液；

3）采用膜過濾設備，將上清液依次用0.45μm，0.22μm濾膜，10000～50000D超濾膜和300～600D納濾膜，所得濾出液即為龍須菜瓊膠寡糖。