[發明專利]一種快速篩選抗黑曲霉的活性物質的方法無效
| 申請號： | 201210346418.9 | 申請日： | 2012-09-18 |
| 公開（公告）號： | CN102851351A | 公開（公告）日： | 2013-01-02 |
| 發明（設計）人： | 陳建明;胡彬;王蔚;陳卓;李芊;楊慧 | 申請（專利權）人： | 國家海洋局第三海洋研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/18 | 分類號： | C12Q1/18;C12R1/685 |
| 代理公司： | 廈門市誠得知識產權代理事務所 35209 | 代理人： | 賴開慧 |
| 地址： | 361000 *** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 篩選 曲霉 活性 物質 方法 | ||
1.一種快速篩選抗黑曲霉的活性物質的方法，其特征在于，包括如下步驟：
將待篩選樣品，刃天青，黑曲霉孢子菌懸液加入到96微孔板中，在37℃恒溫培養箱中培養一定時間，其中設置陰性對照和陽性對照；優選培養12－36h；
得到結果；
根據結果篩選。
2.權利要求1的方法，其特征在于，所述的得到結果為：微孔板的顏色，酶標儀測量熒光值，和抑制率。
3.權利要求2的方法，其特征在于，所述的根據結果篩選為：微孔板的顏色為藍色或紫色，酶標儀測量熒光值低于15000，抑制率為40%以上。
4.權利要求2的方法，其特征在于，所述酶標儀測量激發波長550nm發射波長590nm處的熒光值。
5.權利要求2的方法，其特征在于，所述抑制率的計算公式為：
抑制率%=100%-（實驗孔熒光值-陽性對照熒光值）/（陰性對照熒光值-陽性對照熒光值）*100%。
6.權利要求1的方法，其特征在于，所述陰性對照為無菌水代替待篩選樣品；陽性對照為176ulRPMI-1640培養基代替黑曲霉孢子菌懸液。
7.權利要求1所述的方法，其特征在于，
將4?微升待篩選樣品，20微升200ug/ml刃天青和176微升2.5×104spores/ml黑曲霉孢子菌懸液加入到96微孔板中，在37℃恒溫培養箱中培養24h；
24h后觀察微孔板的顏色變化，并用酶標儀測量激發波長550nm發射波長590nm處的熒光值，然后在由熒光值計數出抑制率；取顏色為藍色或紫色、熒光值低于15000，抑制率為40%以上的微孔，并顯微鏡觀察。
8.權利要求1－7任一方法，其特征在于，待篩選樣品為海洋微生物發酵液提取物。
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