[發(fā)明專利]一種荷茗草醌的提取方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210346075.6
• 申請日: 2012-09-18
• 公開（公告）號: CN102826988A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發(fā)明（設計）人: 劉東鋒
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07C50/34
• 分類號: C07C50/34;C07C46/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于天然物質的提取技術領域，涉及一種荷茗草醌的提取方法。

背景技術

荷茗草醌是從唇形科(Labiatae)荷茗草Horminum?pyrenaicum中分離得到的一種二萜類化合物，分子式為C₁₅H₂₀O₂，分子量為332.44。研究發(fā)現(xiàn)荷茗草醌具有：1.抗菌活性，對金黃色葡萄球菌和霍亂弧菌的MIC都為7.8μg/ml，對白色念珠菌和綠膿桿菌的MIC都為250μg/ml；2.細胞毒活性，抑制小鼠淋巴細胞白血病P388細胞的ED₅₀為4.6μg/ml，對HeLa細胞的IC₅₀為13.5μg/ml，對Hep-2細胞的IC₅₀為15.8μg/ml；3.抗錐蟲活性，體外在30μM濃度時能完全抑制克氏錐蟲(T.cruzi)的生長；4.蛙背神經(jīng)節(jié)試驗表明，本品抑制神經(jīng)元GABA受體控制的氯離子流(chloridecurrent)，且呈濃度依賴關系。

經(jīng)文獻檢索，國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)荷茗草醌的工業(yè)提取方法相關報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高效、環(huán)保的荷茗草醌的提取方法。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案：

1）以荷茗草為原料，加入萃取釜中，以80-85%乙醇溶液為夾帶劑，以超臨界CO₂為溶劑進行萃取，收集萃取物；

2）將萃取物用體積比為2:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶液為萃取劑進行逆流萃取，收集合并萃取液，減壓回收溶劑得濃縮液；

3）將濃縮液用高速逆流色譜分離純化，以正己烷-氯仿-正丙醇-水兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動相，根據(jù)譜圖收集成分，低溫濃縮干燥即得荷茗草醌。

所述步驟1）中超臨界CO₂萃取條件為：萃取溫度為35-50℃，萃取壓力為20-28MPa，分離釜Ⅰ溫度為28-35℃，壓力為6-8MPa，分離釜Ⅱ溫度為25-30℃，壓力為5-6.5MPa。

所述步驟3）中正己烷-氯仿-正丙醇-水體積比為（15-17）：（10-13）：（13-16）：（5-8）。

本發(fā)明的有益效果是：采用超臨界CO₂萃取，低耗能、環(huán)保，采用高速逆流色譜分離荷茗草醌，分離過程無產(chǎn)品損失，高效，制備周期短。

具體實施方式：

下面將結合具體實施方式進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

取荷茗草藥材1000g，加入超臨界CO₂萃取釜中，開啟設備，設置參數(shù)：萃取溫度為50℃，萃取壓力為25MPa，分離釜Ⅰ溫度為35℃，壓力為8MPa，分離釜Ⅱ溫度為30℃，壓力為5MPa，CO₂流量為18L/h，以80%的乙醇溶液為夾帶劑，萃取時間1.5h，得到萃取物，將萃取物加入萃取塔頂，用體積比為2:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶液為萃取劑進行逆流萃取，按與料液流量比2:1從萃取塔底部加入，使兩相混合完成萃取，收集頂部萃有荷茗草醌的萃取液，減壓回收萃取劑得濃縮液。取正己烷、氯仿、正丙醇、水按15:10:13:5比例混合，靜置分層，取上相泵入色譜管，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉速為850rpm，同時把下相以3ml/min流速泵入，注入二濃縮液，紫外檢測器監(jiān)測，收集流分，減壓濃縮后，干燥即得荷茗草醌，含量96.7%，收率81.3%。

實施例2：

取荷茗草藥材1000g，加入超臨界CO₂萃取釜中，開啟設備，設置參數(shù)：萃取溫度為35℃，萃取壓力為25MPa，分離釜Ⅰ溫度為30℃，壓力為7MPa，分離釜Ⅱ溫度為25℃，壓力為6MPa，CO₂流量為20L/h，以85%的乙醇溶液為夾帶劑，萃取時間2h，得到萃取物，將萃取物加入萃取塔頂，用體積比為2:1的石油醚-乙酸乙酯混合溶液為萃取劑進行逆流萃取，按與料液流量比2:1從萃取塔底部加入，使兩相混合完成萃取，收集頂部萃有荷茗草醌的萃取液，減壓回收萃取劑得濃縮液。取正己烷、氯仿、正丙醇、水按17:13:16:8比例混合，靜置分層，取上相泵入色譜管，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉速為850rpm，同時把下相以3ml/min流速泵入，注入濃縮液，紫外檢測器監(jiān)測，收集流分，減壓濃縮后，干燥即得荷茗草醌，含量97.3%，收率84.5%。

實施例3：