[發明專利]一種奇曼堿A的制備方法

無效

• 申請號: 201210345840.2
• 申請日: 2012-09-18
• 公開（公告）號: CN102838538A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 劉東鋒
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D215/233
• 分類號: C07D215/233
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然植物提取領域，具體涉及一種奇曼堿A的制備方法。

背景技術

奇曼堿A（Chimanine?A），分子式C₁₃H₁₅NO，分子量201.27。奇曼堿A是從蕓香科(Rutaceae)?長葉圖臘樹Galipea?longiflora?Krause樹皮、根、莖、皮和葉中提取分離的一種喹啉生物堿類化合物。實驗研究表明，奇曼堿A具有抗寄生蟲作用。體外抗5株利什曼原蟲的IC₉₀為100μg/ml，抗5株克氏錐蟲的IC₉₀為100μg/ml。體內對感染利什曼蟲L.amazonensis?PH8的小鼠也有效。

目前，國內尚未見奇曼堿A的提取純化方法方面的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種奇曼堿A的制備方法，該方法操作簡單、得率高、安全環保，可快速大量分離高純度奇曼堿A。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

（1）提取：取長葉圖臘樹葉粉碎成粗粉，用5-10倍量70-95%的乙醇溶液，25-55℃下進行連續逆流超聲提取20-100min，得到乙醇提取液；

（2）氧化鋁柱層析：上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮；

（3）制備型液相色譜分離：上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監測，收集奇曼堿A組分，將洗脫液旋轉蒸發濃縮，得奇曼堿A粗晶；

（4）重結晶：將奇曼堿A粗晶用氯仿-丙酮重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體。

步驟（1）所述超聲頻率為50-80KHz。

步驟（2）所述氧化鋁為80-120目，氯仿-丙酮體積比為1:1，用量為柱體積的4-7倍。

步驟（3）所述制備型液相色譜的流動相為乙腈-0.15%乙二胺水溶液，體積比為32：68，紫外檢測波長為228nm。

步驟（4）所述氯仿-丙酮的體積比為2-3:1。

本發明的優點在于：1）操作簡單、耗時短，易于產業化放大；2）提取、柱層析、制備液相分離等步驟中的溶劑用量少，并可回收再利用；3）具有較高的經濟效益和學術價值，本發明所得產品純度高，可為奇曼堿A的進一步開發提供藥理原料和實踐支持。

具體實施方式：

下面結合具體實施例對本發明進一步說明：

實施例1：

取長葉圖臘樹葉1kg，粉碎成粗粉，從連續逆流超聲提取設備頭部進料口進料，從連續逆流超聲提取設備尾部溶劑加入口加入10倍95%乙醇溶液，55℃下進行連續逆流超聲提取20min，超聲頻率為80KHz，得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁（120目）拌勻、干燥后裝柱，用7倍柱體積的氯仿-丙酮（1:1）混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經0.45μm微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以乙腈-0.15%乙二胺水溶液為流動相，體積比為32：68，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10μm，柱長為15cm、直徑為4cm，六通閥進樣，進樣體積為25ml，控制流速為50ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為228nm，收集目標成分，減壓回收試劑得奇曼堿A粗晶，用氯仿-丙酮（2.5:1）重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體，經HPLC檢測，純度96.5%。

實施例2：

取長葉圖臘樹葉1kg，粉碎成粗粉，從連續逆流超聲提取設備頭部進料口進料，從連續逆流超聲提取設備尾部溶劑加入口加入10倍80%乙醇溶液，45℃下進行連續逆流超聲提取100min，超聲頻率為60KHz，得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，加氧化鋁（80目）拌勻、干燥后裝柱，用4倍柱體積的氯仿-丙酮（1:1）混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經0.45μm微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以乙腈-0.15%乙二胺水溶液為流動相，體積比為32：68，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10μm，柱長為10cm、直徑為1cm，六通閥進樣，進樣體積為5ml，控制流速為10ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為228nm，收集目標成分，減壓回收試劑得奇曼堿A粗晶，用氯仿-丙酮（3:1）重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體，經HPLC檢測，純度97.8%。

實施例3：