[發明專利]一種難溶于水的絲素蛋白膜及其制備與應用

無效

• 申請號: 201210345312.7
• 申請日: 2012-09-17
• 公開（公告）號: CN102847198A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 陳隆坤;其他發明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 浙江星月生物科技股份有限公司
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L15/32;A61L31/04
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于所述絲素蛋白膜按如下方法制備：（1）以桑蠶絲為原料，經脫膠、溶解、透析，獲得截留液a，將截留液a或截留液a的濃縮液過濾或離心，取濾液或上層離心液得到絲素蛋白溶液；（2）取步驟（1）得到的絲素蛋白溶液，將絲素蛋白溶液的質量濃度用水調整至0.3~30%，倒入模具內，所述模具內絲素蛋白溶液加入量以絲素蛋白質量計為1~50mg/cm2模具，將模具在溫度5~60℃，相對濕度10~70%條件下干燥至無肉眼可見的水分，在模具內形成絲素蛋白膜；（3）將模具在溫度50~100℃，相對濕度70~100%條件下放置20~200min進行濕熱交聯，然后置于體積濃度50~90%的乙醇水溶液中浸洗10~60min，去除模具，絲素蛋白膜再用純化水充分浸洗30~150min至無醇，獲得難溶于水的絲素蛋白膜。

2.如權利要求1所述的難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于步驟（1）所述截留液a的濃縮液制備方法為：將透析后的透析袋放入質量濃度20~60%的聚乙二醇水溶液中，靜置1~10h，取截留液b即為截留液a的濃縮液；所述聚乙二醇平均分子量1000~10000。

3.如權利要求1所述的難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于步驟（1）所述截留液a或截留液a的濃縮液過濾或離心方法為下列之一：a）將截留液a或截留液a的濃縮液于4℃、3000~6000g條件下離心5~20min，棄去沉淀，取上層溶液即為所述的絲素蛋白溶液；b）將截留液a或截留液a的濃縮液用孔徑為2~20μm的濾器過濾，去除不溶性顆粒，濾液即為所述的絲素蛋白溶液。

4.如權利要求1所述的難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于步驟（2）所述模具為底部光滑平整且水平的模具。

5.如權利要求1或4所述的難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于步驟（2）所述模具利用浮法玻璃制成的底部光滑平整且水平的模具，所述模具內質量濃度0.3~30%的絲素蛋白溶液的加入量以絲素蛋白質量計為1~50mg/cm²模具，將模具在溫度5~60℃，相對濕度10~70%條件下干燥至無肉眼可見的水分，在模具內形成表面光滑的絲素蛋白膜；將模具在溫度50~100℃，相對濕度70~100%條件下放置20~200min進行濕熱交聯，然后置于體積濃度50~90%的乙醇水溶液中浸洗10~60min，去除模具，絲素蛋白膜再用純化水充分浸洗30~150min，獲得難溶于水的雙滑型絲素蛋白膜。

6.如權利要求1所述的難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于步驟（2）所述模具為底部毛糙且水平的模具。

7.如權利要求1或6所述的難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于步驟（2）所述模具底部為浮法玻璃經磨砂獲得粗糙面的模具，所述模具內質量濃度0.3~30%的絲素蛋白溶液的加入量以絲素蛋白質量計為1~50mg/cm²模具，將模具在溫度5~60℃，相對濕度10~70%條件下干燥至無肉眼可見的水分，在模具內形成一面光滑，一面粗糙的絲素蛋白膜；將模具在溫度50~100℃，相對濕度70~100%條件下放置20~200min進行濕熱交聯，然后置于體積濃度50~90%的乙醇水溶液中浸洗10~60min，去除模具，絲素蛋白膜再用純化水充分浸洗30~150min，獲得難溶于水的貼滑型絲素蛋白膜。

8.如權利要求1所述的難溶于水的絲素蛋白膜，其特征在于步驟（1）所述脫膠、溶解、透析方法為：a）脫膠：將100g桑蠶蠶絲放入4~8L的2M碳酸鈉水溶液中，90~100℃水浴20~60min，純水清洗，該過程重復3次，脫去絲膠蛋白，留下絲素蛋白，將絲素蛋白在20~60℃烘干，獲得干燥后的絲素蛋白；b）溶解：將上述干燥后的絲素蛋白溶于9~11M的溴化鋰水溶液中，55~65℃水浴30~300min至絲素蛋白充分溶解，獲得含絲素蛋白的混合液；所述干燥后的絲素蛋白與溴化鋰水溶液的質量體積比為0.1~0.2:1；c）透析：將含絲素蛋白的混合液用截留分子量1000~20000道爾頓的透析袋進行透析，用10倍混合液體積的無菌去離子水作為透析液在3天透析10~12次，去除溶液中的溴化鋰成分，獲得截留液a。

9.如權利要求1~8之一所述的難溶于水的絲素蛋白膜在制備防粘連膜、護創膜或人工膜中的應用。

10.如權利要求9所述的應用，其特征在于所述人工膜為引導骨再生膜、胸膜、硬腦膜、硬脊膜、鼓膜或眼角膜。