[發明專利]海水環境中氯氰菊酯降解菌及其分離純化和應用

有效

• 申請號: 201210345258.6
• 申請日: 2012-09-18
• 公開（公告）號: CN102899269A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: 劉菁華;史西志;孫愛麗;李德祥;周磊;陳炯
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;B09C1/10;A62D3/02;C12R1/01;C02F101/38;A62D101/04;A62D101/28
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

1.一種海水環境中氯氰菊酯降解菌，其特征在于：該菌為HS-12菌株，分類命名為海環站菌屬（Mesonia?sp.），于2012年4月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.6045，該菌株的16S?rRNA的Genbank登陸號為JX087927。

2.根據權利要求1所述的海水環境中氯氰菊酯降解菌，其特征在于該菌株的生物學特征如下：革蘭氏陰性，為桿菌，β-半乳糖甙酶、精氨酸雙水解試驗、檸檬酸鹽試驗、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧試驗、V-P反應、明膠液化試驗陽性，尿素酶試驗、H₂S反應、色氨酸脫羧酶、吲哚酶試驗陰性，不可以利用蔗糖。

3.根據權利要求1所述的海水環境中氯氰菊酯降解菌，其特征在于：該菌株海水中生長，最適生長溫度25-30℃，最適生長pH為7.0-7.8，在固體培養基上，菌落圓形、較薄，呈白色，半透明。

4.一種根據權利要求1所述的海水環境中氯氰菊酯降解菌的分離純化方法，其特征在于具體包括如下步驟：

（1）培養基配制

將氯氰菊酯溶液加入到營養培養基中，使氯氰菊酯終濃度為100?mg/L，得到富集培養液；

（2）降解菌分離純化

取500?mL海水樣品于無菌狀態下過濾富集后，加入到富集培養液中，在溫度28℃、轉速180?rpm的條件下，培養7?d，重復上述操作過程3次，每次培養的接種物均取自前次所得培養液，將最后一次培養所得的培養液稀釋8-10倍后，取100μL涂布于含100mg/L氯氰菊酯的固體平板上，28℃恒溫培養箱中培養，直至菌落單一，將純化后的各菌落分別接至富集培養液中振蕩培養，在溫度28℃、轉速180?rpm的條件下，培養7?d，通過氣相色譜-電子捕獲器檢測各富集培養液中擬除蟲菊酯類農藥殘留量，最后篩選獲得一株對氯氰菊酯農藥具有高效降解能力的菌株，即氯氰菊酯降解菌HS-12菌株。

5.根據權利要求4所述的海水環境中氯氰菊酯降解菌的分離純化方法，其特征在于所述的營養培養基配制方法如下：精確稱取磷酸高鐵0.01?g、蛋白胨5.0?g、酵母膏1.0?g，加入過濾海水1000?mL，混合均勻后，調節pH為7.0-7.8，于121℃高壓蒸汽滅菌20?min后制得。

6.一種根據權利要求1所述的海水環境中氯氰菊酯降解菌的應用，其特征在于：該菌株對氯氰菊酯具有較高的生物降解能力，可用于氯氰菊酯農藥污染的海水及沉積物環境的生物修復。

7.一種根據權利要求6所述的海水環境中氯氰菊酯降解菌的應用，其特征在于：該菌株在溫度25-30℃、pH?7.0-7.8、氯氰菊酯農藥濃度100?mg/L的條件下，7?d后對海水中氯氰菊酯的降解率達到90?%以上。