[發明專利]一種基于膜技術提取蟲草被孢菌絲體的方法

有效

• 申請號: 201210344464.5
• 申請日: 2012-09-17
• 公開（公告）號: CN102835652A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 王文風;徐國華;袁兵兵;徐玲;張瑞華;王金恒
• 申請（專利權）人: 江蘇神華藥業有限公司
• 主分類號: A23L1/28
• 分類號: A23L1/28;A23L1/29;A01G1/04;C05G3/00;B01D61/14
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，具體涉及一種提取真菌發酵菌絲體的方法，更確切地說是一種基于膜技術提取發酵蟲草被孢菌絲體的新方法。

背景技術

蟲草被孢菌粉（Powdered?Cordyceps?Mortierella?Mycelia）是從天然冬蟲夏草新鮮標本中分離得到的蟲草被孢新菌株，采用生物工程技術精制而成。通過現代測試手段分析證明：其成分與天然冬蟲夏草基本一致，富含多種氨基酸和微量元素，其中蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖、氨基酸的含量遠遠高于天然冬蟲夏草。與天然蟲草相比，蟲草被孢菌粉具有如下幾大特點：1、在化學成分和藥理作用上與天然蟲草相類似；2、蟲草被孢菌粉毒性低于天然蟲草；3、蟲草被孢菌粉價格遠遠低于天然蟲草，且可大量生產。基于上述獨特優點，蟲草被孢菌粉被廣泛應用于制藥、保健品行業。

傳統蟲草被孢菌絲體分離工藝多采用臥螺離心機進行分離，該方式因受制于離心機分離因子影響，分離過程中菌絲體遭到剪切力破壞，部分有效成分流失到濾液中導致產品質量和收率下降，分離所得濾液較渾濁，里面含有較多的碎菌絲，導致外排濾液COD偏高，需要經過復雜的污水處理，污水處理系統工作量太大，給企業帶來了嚴重的經濟負擔。

發明內容

本發明的目的是為了解決上述蟲草被孢菌絲體分離提取方法的不足，提供一種基于膜技術分離提取蟲草被孢菌絲體的方法，該方法既能提高菌絲體的收率，減少進入濾液的菌絲體，降低濾液的COD，降低污水處理量，又不破壞細胞本身，保證胞內有效成分的全部回收，顯著增加了經濟效益和社會效益。

本發明的目的主要按照下述步驟實現的：

一種基于膜技術提取蟲草被孢菌絲體的方法，該方法包括以下步驟：

1）取殘糖小于0.5，還原糖低于0.3，發酵液粘度100～150cP的蟲草被孢發酵液通過微濾膜，得到發酵液的微濾透析液和菌絲體，收集得到菌絲體；微濾膜孔徑在0.05～1μm，操作溫度為10～70℃，工作壓力：進壓為2～8bar，出壓為0～5bar；

2）低溫真空烘干：將步驟1）所得的菌絲體在真空度為-0.065～-0.095Mpa，70～90℃條件下進行干燥，所得干燥物即為蟲草被孢菌絲體。

該方法優選微濾膜孔徑在0.05～0.5μm，操作溫度為50～60℃，工作壓力：進壓為2～4bar，出壓為1～2bar。優選微濾膜孔徑在0.05μm，操作溫度為50～60℃，工作壓力：進壓為3bar，出壓為1bar，微濾膜為陶瓷膜或有機膜。

所述的干燥時間為30～35小時，得到的干燥物含水量為3～8%。

該方法所述的發酵液可以通過以下方法制備得到：蟲草被孢菌株常規活化后制備蟲草被孢種子液，制備好的種子液接種到發酵培養基，接種量3%～5%，發酵培養基組成為葡萄糖4%，酵母粉2%，蛋白胨3%，磷酸二氫鉀0.3%，硫酸鎂0.03%，消泡劑0.1%，用水配制，pH值自然，發酵液結束后檢測發酵液濃稠，發酵液pH值3.45～3.55，發酵液殘糖小于0.5，還原糖低于0.3，粘度100～150cP。該發酵液也可以通過其他常規方法制備。

本發明所使用的微濾膜可再生，再生用1～2％硝酸和1～2％液堿，將堿洗水和酸洗水中和得到含有無機鹽離子的中性水，該水作為發酵配料用水。

本發明采用的蟲草被孢菌菌種不限于某個生產廠家，市售均可，如已寄存于中國林業微生物菌種保藏管理中心的蟲草被孢菌菌種Cordyceps，保藏編號CFCC?5977等可自由分讓的蟲草被孢菌菌種均可以使用。

本發明為蟲草被孢分離提取提供了一種新的方法。該方法具有以下幾個突出的優點：

1、提高收率：微濾膜孔徑0.05～1μm，顯著提高了菌絲體得率。

2、提高產品質量：傳統臥螺離心機分離過程中蟲草被孢菌絲體遭到剪切力破壞，主要有效成分部分流失到濾液中導致菌絲體有效成分降低，該工藝采用微濾膜過濾，操作過程中不會產生剪切力，可以有效保證菌絲體有效成分；

3、降低濾出液COD，減輕環保壓力：傳統臥螺分離由于菌絲體截留率低，部分菌絲體進入濾液，導致濾液中COD含量增高，本方法分離因子高，對菌絲體截留率大大增加，濾液澄清，濾液中菌絲體少，得到的透析液COD大大降低，其COD指標可以達到直接排放標準，僅污水處理每天就為企業減少30噸處理量，大大降低了污水處理費用。

4、清潔連續生產，能耗低：本發明方法可連續生產，膜及其配套設備使用壽命長，裝置維護方便，投資少，操作過程無噪聲污染，易清潔。