[發(fā)明專利]一種雙膜法提取云芝胞外多糖的方法

有效

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• 申請日: 2012-09-17
• 公開（公告）號: CN102827304A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發(fā)明（設計）人: 王文風;徐國華;袁兵兵;徐玲;張瑞華;王英燕
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇神華藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

技術(shù)領域

本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領域，具體涉及一種提取真菌胞外多糖的方法，更確切地說是一種基于膜技術(shù)提取云芝胞外多糖的方法。

背景技術(shù)

云芝胞內(nèi)糖肽也稱云芝糖肽，由云芝胞內(nèi)糖和胞外多糖組成，是運用現(xiàn)代生物工程技術(shù)從云芝菌中提取精制的具有生理活性的蛋白多糖物質(zhì)，其功效成分含量遠高于云芝菌本身，且易于被人體吸收。

傳統(tǒng)的云芝胞外多糖生產(chǎn)是將分離后的云芝發(fā)酵濾液濃縮到一定倍數(shù)后進行多次酒精醇沉，去除其中的單糖，提高多糖含量。但是在醇沉過程中由于單糖往往伴隨著多糖同時被醇沉下來，單糖去除率較低，因此需要多次醇沉，耗費酒精和人工較多，生產(chǎn)成本較高；同時，傳統(tǒng)的熱濃縮方式，耗用大量的蒸汽，對生產(chǎn)成本和產(chǎn)品質(zhì)量有較大影響。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決上述云芝胞外多糖分離純化方法的不足，從而提供一種基于膜技術(shù)來提取云芝胞外多糖的方法，該方法既提高了云芝胞外多糖的提取效果，又減少了廢水的排放，增加了社會效益。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明主要按照下述步驟進行：

一種雙膜法提取云芝胞外多糖的方法，該方法包括下述步驟：

1）將云芝發(fā)酵液通過微濾膜，得到微濾透析液和菌絲體，收集微濾透析液；其中，微濾膜的孔徑在0.05～1μm，操作溫度為10～70℃，工作壓力：進壓為2～8bar，出壓為0～5bar；

2）將步驟1）中的微濾透析液通過超濾膜，得到超濾透析液和濃縮液，收集濃縮液；其中，超濾選擇截留分子量為800～1000Da的超濾膜，操作溫度為38～50℃，工作壓力：進壓為1～8bar，出壓為0.5～3bar；

3）將步驟2）中超濾濃縮液在低溫條件下濃縮得到濃縮漿；濃縮漿再進一步低溫真空烘干至干燥物水分含量為3～8%，即得。所得干燥物即為云芝胞外多糖。

優(yōu)選將步驟2）中超濾濃縮液在40～80℃條件下濃縮到固形物含量為30～70%得到濃縮漿，再將所得的濃縮漿在60～75℃，真空度-0.08～-0.085Mpa的條件下進行烘干，烘干至干燥物水分含量為3～8%。

優(yōu)選微濾采用孔徑為0.05～0.5μm的微濾膜，進一步優(yōu)選微濾采用孔徑為0.05μm的微濾膜，微濾采用50～60℃的操作溫度，進壓為2～4bar，出壓為0.8～1.5bar，最優(yōu)選微濾采用孔徑為0.05μm的微濾膜，微濾采用50～60℃的操作溫度，進壓為3bar，出壓為1bar。優(yōu)選超濾采用截留分子量為800～1000Da的超濾膜，超濾采用40～45℃的操作溫度，進壓為6～8bar，出壓為1～3bar。最優(yōu)選超濾采用截留分子量為1000Da的超濾膜，超濾采用40℃的操作溫度，進壓為7bar，出壓為2bar。

本發(fā)明微濾所用膜為陶瓷膜或有機膜。超濾所用膜材料可選用PAN、PVDF、PC、PES、PP、PE復合膜中的一種。

云芝胞外多糖是生物活性產(chǎn)品，經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)其對溫度較為敏感，若溫度超過60℃，每升高5℃，云芝胞外多糖指標下降10%。在不超過60℃范圍內(nèi)，分別選取20、30、40、50、60℃5個溫度進行膜分離的操作，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在這5個溫度操作所得到的云芝胞外多糖其理化指標相差不大，但是不同溫度下膜通量及維持該溫度所產(chǎn)生的能耗大不相同，低溫下膜通量較小，而且維持低溫所需冷卻水較大，溫度升高，操作過程不需要冷卻水或需要極少的冷卻水，優(yōu)選膜過濾溫度范圍40～60℃，進一步優(yōu)選微濾膜50～60℃，超濾膜40～45℃。

本發(fā)明采用云芝發(fā)酵液通過微濾膜，得到發(fā)酵液的微濾透析液和菌絲體，菌絲體可用于提取云芝胞內(nèi)糖；微濾透析液通過超濾膜，得到超濾透析液和濃縮液，超濾透析液可作為發(fā)酵配料水；經(jīng)雙膜處理后可顯著降低生產(chǎn)成本。

與現(xiàn)有技術(shù)比較本發(fā)明生產(chǎn)方法為云芝胞外多糖分離提取提供了一種新的方法，該方法具有以下幾個突出的優(yōu)點：

1、微濾除菌絲體提高菌絲體得率，操作過程中無機械力破壞，極大程度保存了菌絲體內(nèi)云芝胞內(nèi)糖成分，配套成本低，無須板框、離心機等裝置；

2、超濾膜的過濾精度高，單糖去除率高，提高云芝胞外多糖產(chǎn)品質(zhì)量；同時，超濾透析液中含有單糖，可作為發(fā)酵配料用水，減少了污水處理量；

3、用超濾膜進行預濃縮，實現(xiàn)冷濃縮，減少蒸汽用量，降低生產(chǎn)成本；

4、本發(fā)明生產(chǎn)過程無酒精消耗，極大的降低了生產(chǎn)成本和工時消耗，同時，本發(fā)明實現(xiàn)清潔自動化生產(chǎn)，極大改善了工作環(huán)境。