[發明專利]基于CyPA和Gag的DNA疫苗

有效

• 申請號: 201210341820.8
• 申請日: 2012-09-07
• 公開（公告）號: CN103656675B
• 公開（公告）日: 2019-11-19
• 發明（設計）人: 邵一鳴;侯爵;劉穎
• 申請（專利權）人: 中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K39/21;A61P31/18
• 代理公司: 11376 北京永新同創知識產權代理有限公司
• 代理人: 程大軍<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發明涉及基于CyPA和Gag的DNA疫苗，其包含編碼CyPA的多核苷酸和編碼HIV的Gag蛋白的多核苷酸，其中所述DNA疫苗在接種于人類對象后允許在所述對象中表達所述CyPA和Gag蛋白，并由此引發Gag?特異性的抗HIV免疫應答。本發明還涉及使用所述DNA疫苗在人類對象中預防或治療HIV感染的方法。

技術領域

本發明涉及HIV感染的治療和預防。具體而言，本發明涉及一種DNA疫苗，其包含編碼CyPA的多核苷酸和編碼HIV的Gag蛋白的多核苷酸，其中所述DNA疫苗在接種于人類對象后允許在所述對象中表達所述CyPA和Gag蛋白或其片段，并由此引發Gag-特異性的抗HIV免疫應答。本發明還涉及使用所述DNA疫苗在人類對象中預防或治療HIV感染的方法。

背景技術

DNA疫苗問世已有二十多年，盡管其具有安全性高、構建周期短、能誘導一定強度特異性免疫應答尤其是T細胞應答等優勢，但其仍然有投送效率低和免疫原性弱的巨大瓶頸。利用佐劑來提高DNA疫苗的免疫原性是有效途徑之一。針對DNA疫苗這一特殊的疫苗形式，篩選一些在DNA疫苗中能夠發揮佐劑效應的基因對于DNA疫苗的研發重大具有意義。現行臨床試驗研究顯示，HIV-1 Gag DNA疫苗誘導的特異性免疫應答較弱，通過改良疫苗載體及投送途徑均不能有效引發針對Gag的細胞免疫應答，因此需要新的Gag特異性的基因佐劑以增強其免疫應答強度。

研究顯示在人體細胞組成型表達的肽基脯氨酸順反異構酶親環素A(CyclophilinA，CyPA)與HIV-1 Gag蛋白的片段P24的N末端存在特異性相互作用，并使得CyPA這種胞漿宿主蛋白特異性的摻入到病毒顆粒中(Franke EK，Yuan HE，Luban J.Specificincorporation of cyclophilin A into HIV-1virions.Nature 1994；372：359-62；ThaliM，Bukovsky A，Kondo E，Rosenwirth B，Walsh CT，Sodroski J，et al.Functionalassociation of cyclophilin A with HIV-1 virions.Nature 1994；372：363-5)。并證實，這種特異性的相互作用顯著影響病毒的復制能力(Braaten D，Luban J.Cyclophilin Aregulates HIV-1infectivity，as demonstrated by gene targeting in human Tcells.The EMBO journal 2001；20：1300-9)以及引發的宿主針對HIV-1病毒的天然免疫應答(Manel N，Hogstad B，Wang Y，Levy DE，Unutmaz D，Littman DR.A cryptic sensor forHIV-1 activates antiviral innate immunity in dendritic cells.Nature2010；467：214-7)。

發明內容

本發明基于以下發現，即與僅表達HIV Gag蛋白的DNA構建體相比，同時表達CyPA蛋白和HIV Gag蛋白的DNA構建體在接種于對象后能夠引發增強的針對Gag的特異性免疫應答。

因此，本發明提供一種DNA疫苗，其包含免疫學有效量的編碼CyPA的第一多核苷酸和編碼HIV的Gag蛋白或其免疫原性片段的第二多核苷酸，其中所述第一多核苷酸和第二多核苷酸分別可操縱地連接于啟動子，且所述DNA疫苗在接種于人類對象后允許在所述對象中表達所述CyPA和Gag蛋白或所述片段，并由此引發Gag-特異性的抗HIV免疫應答。

在本發明的DNA疫苗中，所述第一多核苷酸編碼的CyPA包含與SEQ ID NO：1具有至少70％相同性的氨基酸序列。優選地，所述CyPA包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列。