[發(fā)明專(zhuān)利]長(zhǎng)鏈非編碼RNA作為疾病診斷血液分子標(biāo)志物的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210337606.5
• 申請(qǐng)日: 2012-09-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103146688A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫穎浩;任善成;王富博;沈劍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海長(zhǎng)海醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/11
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/11;C12N15/63;C12Q1/68;C40B40/06
• 代理公司: 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及長(zhǎng)鏈非編碼RNA作為疾病診斷血液分子標(biāo)志物的應(yīng)用。?

背景技術(shù)

癌癥是目前威脅人類(lèi)生存、影響健康的最主要疾病。前列腺癌（Prostate?cancer,PCa)是發(fā)達(dá)國(guó)家發(fā)病率最高的男性惡性實(shí)體腫瘤之一，占全球癌死亡率第6位。我國(guó)前列腺癌的發(fā)病率近年來(lái)一直處于顯著的上升趨勢(shì)。在北京、上海、廣州等醫(yī)學(xué)、經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)城市，前列腺癌發(fā)病率已位于當(dāng)?shù)厥蟪Ｒ?jiàn)腫瘤之列。來(lái)自上海市疾病控制中心的資料顯示，前列腺癌的發(fā)病率自2002年起已躍居男性泌尿生殖系惡性腫瘤的首位。流行病學(xué)數(shù)據(jù)還顯示，中國(guó)前列腺癌發(fā)病率已從1993年的1.71/10萬(wàn)男性人口增加到2005年的7.9/10萬(wàn)男性人口，年增幅13%。依次推算，預(yù)計(jì)至2020年，我國(guó)前列腺癌發(fā)病率將超過(guò)40/10萬(wàn)人口男性，接近歐美國(guó)家水平，成為危害男性健康的主要腫瘤“殺手”。?

早期前列腺癌局限于包膜內(nèi)，但當(dāng)腫瘤擴(kuò)散到包膜外或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(shí)，腫瘤的治療就顯得相當(dāng)困難，且預(yù)后效果很差。因此，前列腺癌的早期診斷就顯得尤為重要。前列腺特異性抗原（Prostate?specific?antigen，PSA）作為目前診斷前列腺癌最為公認(rèn)、應(yīng)用最為廣泛的分子診斷標(biāo)記物，在目前前列腺癌的診斷方面起著極為重要的作用，但它在明顯提高腫瘤診斷率的同時(shí)也有著越來(lái)越大的局限性。例如，PSA處于正常范圍（<4.0ng/ml），前列腺穿刺陽(yáng)性率為15.2%；在PSA的診斷灰區(qū)（4-10ng/ml），前列腺穿刺及反復(fù)穿刺陰性率為78%和90%。美國(guó)一項(xiàng)臨床隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)表明，PSA作為PCa的診斷標(biāo)記物不能降低癌死亡率。?

因此亟需找到PCa特異性更高的分子診斷標(biāo)記物和相關(guān)的檢測(cè)技術(shù)。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是提供長(zhǎng)鏈非編碼RNA作為疾病診斷血液分子標(biāo)志的應(yīng)用。?

在本發(fā)明的第一方面，提供了一種分離的lncRNA，所述的lncRNA選自：?

(1)序列如SEQ?ID?NO:n所示的lncRNA，其中n為選自1-9的正整數(shù)；或?

(2)與SEQ?ID?NO:n所示序列互補(bǔ)的lncRNA，其中n為選自1-9的正整數(shù)。?

在另一優(yōu)選例中，所述的lncRNA為序列如SEQ?ID?NO:2、SEQ?ID?NO:6、或SEQ?ID?NO:7所示的lncRNA。?

在另一優(yōu)選例中，所述的lncRNA為序列SEQ?ID?NO:7所示的lncRNA。?

在另一優(yōu)選例中，所述的lncRNA分離自人或非人哺乳動(dòng)物的血液。?

在另一優(yōu)選例中，所述的血液為血漿和/或血清。?

在另一優(yōu)選例中，所述的血液不包括血細(xì)胞。?

在另一優(yōu)選例中，所述的非人哺乳動(dòng)物為小鼠、大鼠、兔、豬、牛、羊等。?

在另一優(yōu)選例中，所述的lncRNA分離自人。?

在本發(fā)明的第二方面，提供了一種lncRNA集，所述的lncRNA集由序列如SEQID?NO:1-9中所示的至少2種lncRNA所構(gòu)成。?

在另一優(yōu)選例中，所述的lncRNA集至少包括如SEQ?ID?NO:6所示的lncRNA。?

在另一優(yōu)選例中，所述的lncRNA集由序列如SEQ?ID?NO:1-9中所示的9種lncRNA所構(gòu)成。?

在本發(fā)明的第三方面，提供了一種分離的前體lncRNA，所述的前體lncRNA能在人細(xì)胞內(nèi)剪切并表達(dá)成第一方面所述的lncRNA。?

在另一優(yōu)選例中，所述的前體lncRNA分離自人或非人哺乳動(dòng)物的血液。?

在本發(fā)明的第四方面，提供了一種分離的多核苷酸，所述的多核苷酸能被人細(xì)胞轉(zhuǎn)錄成第一方面所述的lncRNA。?

在另一優(yōu)選例中，所述的多核苷酸具有式I所示的結(jié)構(gòu)：?

Seq_正向-X-Seq_反向????式I，?

式I中，?

Seq_正向為能在人細(xì)胞中表達(dá)成所述的lncRNA的核苷酸序列；?

Seq_反向為與Seq_正向基本上互補(bǔ)或完全互補(bǔ)的核苷酸序列；?

X為位于Seq_正向和Seq_反向之間的間隔序列，并且所述間隔序列與Seq_正向和Seq?_反向不互補(bǔ)；?