[發明專利]胖大海藥材指紋圖譜的構建方法及其標準指紋圖譜

在審

• 申請號: 201210337372.4
• 申請日: 2012-09-13
• 公開（公告）號: CN102830186A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 王如峰;安燕南;袁銘;吳秀穩
• 申請（專利權）人: 北京中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

發明領域

本發明涉及胖大海藥材的高效液相色譜指紋圖譜的構建方法及其標準指紋圖譜的確定。

背景技術

胖大海是梧桐科蘋婆屬植物燈籽蘋婆Sterculia?lychnophora?Hance的干燥成熟種子。其主產地位于泰國、越南、印度和馬來西亞等熱帶地區。我國使用的胖大海大部分從這些國家進口。胖大海的主要藥理作用為抗炎、抗病毒、抗菌等(杜力軍，等.中藥材，1995，18(8)：409-410；曲本欽，等.中華醫學雜志，1954，(5)：337-340；Feng，DR，et?al.J?Chin?Med，1942，61A：9-11)。目前報道的胖大海中的化學成分主要包括糖類、黃酮類、生物堿類和脂肪酸類(陳建民，等.中藥材，1995，18(11)：567-569；陳建民，等.中國中藥雜志，1996，21(1)：39-41；Wang?RF，et?al.Phytochemistry，2003，63(4)：475-478)。胖大海中的糖類由單糖、寡糖和多糖組成，例如鼠李糖、阿拉伯糖、蔗糖、半乳糖、半乳糖乙酸、半乳糖醛酸、正丁基甘露糖苷、水溶性多糖P?I、PII、PPIII、堿溶性多糖PH、西黃芪粘膠素等。黃酮類主要有槲皮素、槲皮素-3-O-蕓香糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、異鼠李素-3-O-蕓香糖苷等。生物堿類僅有蘋婆堿I和蘋婆堿II報道。另外還包含有機酸類如咖啡酸和2，4-二羥基苯甲酸等。但是，迄今為止還沒有關于胖大海的指紋圖譜的報道。指紋圖譜可以從整體上反映中藥所含化學成分的種類及含量多少，目前已經成為公認的評價中藥質量和鑒別中藥品種的有效手段之一。因此，構建胖大海的指紋圖譜并確定其標準指紋圖譜，對胖大海的質量評價和真偽鑒別具有重要的意義。

發明內容

本發明的目的為提供一種構建胖大海藥材指紋圖譜的方法，以及通過該方法得到的胖大海藥材的標準指紋圖譜。其特征為：用20倍量(重量：體積)的70％乙醇在25℃超聲提取胖大海藥材粉末50min，將提取液過濾后進行高效液相色譜分析。分析的色譜條件為：Kromasil-C₁₈(250mm×4.6mm，5μm)色譜柱，帶預柱；流動相為乙腈-0.5％醋酸水溶液；流速為0.74mL/min；檢測波長為220nm；柱溫30℃；梯度洗脫程序為：0min(5％乙腈)→30min(21％乙腈)→33min(33％乙腈)→36min(5％乙腈)→41min(5％乙腈)。在上述條件下測定購自中國各地的10批胖大海藥材，得到其指紋圖譜。通過分析這些胖大海藥材的指紋圖譜，確定了其中20個色譜峰為共有的特征峰(其中包括2，4-二羥基苯甲酸和尿嘧啶的色譜峰)，得到胖大海藥材的標準指紋圖譜(圖1)。20個共有特征峰保留時間分別為3.928min、8.030min、14.079min、15.610min、17.025min、18.783min、20.383min、22.672min、23.088min、25.828min、27.838min、29.154min、30.610min、32.066min、32.421min、32.962min、33.673min、35.409min、35.978min、36.885min。

附圖說明

圖1胖大海藥材的標準指紋圖譜。

參見圖1，通過對10批胖大海藥材的指紋圖譜進行分析得到的標準指紋圖譜包括20個共有特征峰，其中7號峰為2，4-二羥基苯甲酸，19號峰為尿嘧啶。

具體實施方式

下面結合具體實施例，對本發明作進一步說明。

實施例

1.提取溶劑考察

精密稱取胖大海粉末4份，每份1.000g，置具塞錐形瓶中。加入20倍量(重量：體積)的純水、40％乙醇、70％乙醇、100％乙醇，稱重。在25℃超聲提取50min。放冷，稱重并補足減失的重量。過濾，取續濾液以0.45μm微孔濾膜濾過，進樣液相色譜儀。經過綜合比較色譜峰數目和峰面積，確定70％乙醇為最佳提取溶劑。

2.色譜條件考察

對不同的色譜柱、流動相、流速和檢測波長進行了考察，最終確定色譜條件為：Kromasil-C₁₈(250mm×4.6mm，5μm)色譜柱，帶預柱；流動相為乙腈-0.5％醋酸水溶液；流速為0.74mL·min^-1；檢測波長為220nm；柱溫30℃；梯度洗脫程序為：0min(5％乙腈)→30min(21％乙腈)→33min(33％乙腈)→36min(5％乙腈)→41min(5％乙腈)。