[發明專利]一種快速制備大豆抗氧化肽的工藝方法

無效

• 申請號: 201210336336.6
• 申請日: 2012-09-13
• 公開（公告）號: CN102796795A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發明（設計）人: 劉靜波;劉丹;周玉權
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速制備大豆抗氧化肽的工藝方法，其特征在于，利用微波技術，包括大豆濃縮蛋白粉的調配、大豆濃縮蛋白粉乳濁液的預處理、大豆濃縮蛋白粉乳濁液的微波輔助酶解處理，酶解液的滅酶、離心、超濾處理，真空冷凍干燥處理的工藝過程，可以實現物料經過微波萃取儀，其酶解時間縮短至35～38min，與常規酶解相比，效率提高了6～7倍，且ABTS自由基清除率為72％以上，高于常規酶解4～5h時的清除率。

1)所述的大豆濃縮蛋白粉的調配過程，是選用蛋白含量為70％的大豆濃縮蛋白粉為原料，以pH值為8～8.5的緩沖液為溶劑，配制成大豆蛋白底物濃度為5％～6.5％的乳濁液，通過數顯高速分散均質機高速攪拌3～5min，使其乳濁液狀態更加均一穩定。

2)所述的大豆濃縮蛋白粉乳濁液的預處理，先在90℃超級恒溫水浴中加熱3～5min，隨后將微波萃取儀的參數設為：功率700～800W，溫度75～85℃，時間2～4min，轉速800～1000r，對乳濁液進行預處理，使蛋白質快速變性，從而有利于后期的酶解。

3)所述的大豆濃縮蛋白粉的微波輔助酶解處理，是將預處理后的大豆乳濁液在冰浴中快速冷卻，隨后在55～60℃的超級恒溫水浴中保溫8～10min，加入Alcalase堿性蛋白酶，其酶量為4.5％～7.5％。設定的微波萃取儀參數為：功率400～600W，溫度55～60℃，時間35～38min，轉速800～1000r。將加入酶的乳濁液置于微波萃取儀中，按照設定好的參數進行快速酶解。

4)所述酶解液的滅酶、離心、超濾處理，是將微波萃取儀的參數設為：功率800～900W，溫度80～90℃，時間2～3min，轉速800～1200r，對酶解液進行滅酶處理。隨后將其在冰浴中快速冷卻至室溫。將離心機的參數設定為：溫度4～6℃，時間10～15min，轉速8000～10000r，離心后，取其上清液備用。超濾采用孔徑為1000Da的膜過濾，除去雜質大分子。

5)所述的真空冷凍干燥處理的過程，是將膜過濾的濾液，分裝于冷凍盒中，其液體平鋪厚度不超過5mm，置于預凍溫度為-25℃的冰柜中，預凍時間為2～3h，隨后將其置于真空冷凍干燥機中，參數設定為溫度-55～-45℃，壓力35～65Pa，凍干時間為12～18h，凍干粉末含水量低于2％。

2.根據權利要求1所述的大豆濃縮蛋白粉的調配過程，其特征在于原料還可以是大豆分離蛋白粉、大豆蛋白粉。

3.根據權利要求1所述的大豆濃縮蛋白粉的調配過程，其特征在于所用的緩沖液可以是磷酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液中的任意一種。

4.根據權利要求1所述的大豆濃縮蛋白粉乳濁液的預處理，其特征在于使蛋白質快速變性的微波萃取儀參數為：功率700～800W，溫度75～85℃，時間2～4min，轉速800～1000r。

5.根據權利要求1所述的大豆濃縮蛋白粉的微波輔助酶解，其特征在于所用的酶為Alcalase堿性蛋白酶，酶量為4.5％～7.5％。所需要設定的微波萃取儀參數為：功率400～600W，溫度55～60℃，時間35～38min，轉速800～1000r。

6.根據權利要求1所述的酶解液的滅酶、離心、超濾處理，其特征在于滅酶的微波萃取儀的參數為：功率800～900W，溫度80～90℃，時間2～3min，轉速800～1200r。