[發明專利]雙酶偶聯提取葫蘆巴膠的方法

無效

• 申請號: 201210333151.X
• 申請日: 2012-09-11
• 公開（公告）號: CN102816253A
• 公開（公告）日: 2012-12-12
• 發明（設計）人: 張繼;趙保堂;姚健;梁俊玉;李晶晶;陶彥佼
• 申請（專利權）人: 西北師范大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心 62100
• 代理人: 張英荷

技術領域

本發明涉及一種葫蘆巴膠的提取方法，尤其涉及一種雙酶偶聯提取葫蘆巴膠的方法。

背景技術

胡蘆巴（Trigonellafoenum-graecumL.）為豆科蝶形花亞科胡蘆巴屬的一種一年生草本植物，廣泛分布于亞洲、非洲和歐洲。葫蘆巴植物地上部分干后有特殊香氣，可防蟲滅虱。其種子為中藥材，亦作為醫藥工業的原料。食品工業則廣泛用于咖啡、香精等，也用于煙草、糖果。葫蘆巴膠是從葫蘆巴種子胚乳中提取出的一種多糖膠，主要成分是半乳甘露聚糖。葫蘆巴膠是天然高分子，具有較好的水溶性和交聯性，較強的增稠能力和懸浮能力，在石油行業中代替化學材料用作壓裂液稠化劑和鉆井液懸砂劑應用，從而避免了對地層的污染。由葫蘆巴膠及其衍生物制成的絮凝劑已經成為塑料炸藥的一種基本成分而作為工業漿狀炸藥的重要膠結劑被應用。此外，葫蘆巴膠在印刷、農藥、森林滅火劑和化妝品行業中有廣泛的應用。研究證明葫蘆巴膠能有效的控制藥物的釋放，使藥物能安全、無毒副作用的到達病變處，可作為良好的藥物載體被應用。

目前，制備葫蘆巴膠的主要方法有熱水提取、超聲波輔助提取、微波輔助提取等方法，常規熱水提取耗時耗力，提取率不高；超聲波輔助提取、微波輔助提取往往會使提取物的結構發生改變，使天然產物的生物學活性改變或喪失。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中存在的問題，提供一種纖維素酶-脂肪酶偶聯提取葫蘆巴膠的方法。

本發明纖維素酶-脂肪酶偶聯提取葫蘆巴膠的方法，是以葫蘆巴種子為原料，經破粉碎后，先利用纖維素酶進行破壁處理，鈍化酶活后固液分離，清液中加入脂肪酶進行破乳，鈍化酶活后油水分離，水層經濃縮、干燥，得到葫蘆巴膠。其具體提取工藝如下：

a：將葫蘆巴種子粉碎至粒度為200目以上，充分溶于水中（原料:水=1:50～100?g/mL）；攪拌下加入占葫蘆巴種子粉干重的0.2%～0.5%的纖維素酶，調PH至3.0～6.0，于30℃～65℃提取2～5h；升溫至80～85℃，使纖維素酶滅活；收集提取液，冷卻至室溫，高速離心分離（在4000～5000轉/分鐘的轉速下進行），收集清液，得物質A；

b：在物質A中加入占葫蘆巴種子粉干重的0.6%～1.0%的脂肪酶，調PH至5.0～8.0，于30℃～60℃提取3～4h；升溫至65℃～70℃，使脂肪酶滅活；收集提取液，冷卻至室溫，油水分離，收集水層，得物質B；

c：將物質B在0.07～0.09Mpa下減壓濃縮至原體積的1/5～1/7；然后在濃縮液中加入乙醇，使乙醇含量占總體積的80～85％；室溫下靜置20～24小時；沉淀物在-65℃～-60℃，1～10Pa下冷凍干燥24～36小時，得葫蘆巴膠C。

圖1為本發明提取的葫蘆巴膠的紅外光譜。紅外光譜顯示：在3396^-1nm處有O-H的伸縮振動峰，在2939^-1nm處出現一寬峰，為C-H鍵的變角振動引起的，1612^-1nm為-COO^-?的伸縮振動峰，1060^-1nm為-CO的伸縮振動，這些均為多糖的吸收峰，說明提取物的主要成分是多糖，葫蘆巴膠提取成功。

本發明相對現有技術具有以下有益效果：

1、本發明利用纖維素酶對葫蘆巴種子進行處理，破壞了葫蘆巴種子的細胞壁，可較溫和地將葫蘆巴種子組織分解，使葫蘆巴膠能更有效的從種子中釋放出來，簡化了提取工藝，縮短提取葫蘆巴膠的時間；再利用脂肪酶對葫蘆巴種子中的游離脂肪具有水解作用，使葫蘆巴膠結構變得松散，同時還會結合態的脂肪水解，降低了它們與原料的結合力，有利于葫蘆巴膠的浸出，以除去所含的油脂，提高了提取效率。經測定，本發明葫蘆巴膠的收率為8~10%。

2、本發明工藝簡單，反應條件溫和，能耗低；?

3、本發明不使用有機溶劑，安全環保。

附圖說明

圖1為本發明的方法制備葫蘆巴膠的工藝流程圖；

圖2為本發明的方法制備出的葫蘆巴膠的紅外掃描圖。

具體實施例

下面通過實施例對本發明纖維素酶-脂肪酶雙酶偶聯提取葫蘆巴膠的方法詳細的說明。

實施例1