[發明專利]一種疏水性多肽修飾抗體的合成方法在審
| 申請號： | 201210333076.7 | 申請日： | 2012-09-11 |
| 公開（公告）號： | CN103665095A | 公開（公告）日： | 2014-03-26 |
| 發明（設計）人： | 高志賢;周煥英;劉忠文;張亦紅;劉飛;陳風春;劉芳;蘇璇 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所 |
| 主分類號： | C07K1/107 | 分類號： | C07K1/107 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 300050*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 疏水 多肽 修飾 抗體 合成 方法 | ||
1.一種疏水性多肽修飾抗體的合成方法，具體涉及一種采用疏水性多肽RRRRRRRR或AC-FAAAVLAAPIL修飾雌二醇抗體的合成方法，其特征在于包括以下合成步驟：
(1)配制20-150mg/mL的疏水性多肽溶液，溶劑為10-30％的甲醇。
(2)按照多肽：NHS：EDC摩爾質量為1∶2∶2-5的比例向多肽溶液中依次加入N-羥基丁二酰亞胺(NHS)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)，充分溶解后，800-1000轉/分鐘避光震蕩反應15-30分鐘，得到活化后的多肽溶液。
(3)按照活化后的多肽和抗體30-40∶1的摩爾質量比，將活化后的多肽溶液逐滴加于3-6倍體積的抗體磷酸鹽緩沖溶液(PBS)中，4℃避光反應8-12小時。
(4)超濾離心去處未結合的多肽。
(5)將超濾管中剩余液體用適量的PBS重新定容，從超濾管吸出，冰箱4℃保存備用。
2.根據權利要求1所述的合成方法，如上所述的多肽為RRRRRRRR或AC-FAAAVLAAPIL。
3.根據權利要求1所述的合成方法，如上所述的抗體為水溶性抗體。
4.根據權利要求1所述的合成方法，如上所述的磷酸鹽緩沖溶液pH6.5-7.5，濃度為0.01mol/L。
5.根據權利要求1所述的合成方法，所述超濾離心使用離心管所用膜：5000-20000MWCO?PES。
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