[發明專利]一種用于組織細胞基因組DNA的核酸吸附快速分離方法無效
| 申請號: | 201210332754.8 | 申請日: | 2012-09-11 |
| 公開(公告)號: | CN102864139A | 公開(公告)日: | 2013-01-09 |
| 發明(設計)人: | 饒國洲;李昂;茍建重;石建峰;魏紅 | 申請(專利權)人: | 西安交通大學口腔醫院 |
| 主分類號: | C12N15/10 | 分類號: | C12N15/10;C07H21/04;C07H1/08 |
| 代理公司: | 西安恒泰知識產權代理事務所 61216 | 代理人: | 李鄭建 |
| 地址: | 710004 陜西*** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 組織細胞 基因組 dna 核酸 吸附 快速 分離 方法 | ||
1.一種用于組織細胞基因組DNA的核酸快速分離方法,其特征在于,該方法采用核酸吸附離心套管,用DNA提取試劑從勻漿后的組織或消化后的細胞中快速分離DNA,所述的DNA提取試劑由懸浮溶液、離解溶液、清除溶液、洗滌溶液、分離溶液組成,具體操作過程是:
收集經勻漿后的組織或消化后的細胞,加懸浮溶液懸浮,然后用離解溶液將基因組DNA從組織或細胞中離解出來,通過核酸吸附管中吸附層的吸附,用清除溶液清除蛋白質及其他雜質,再用洗滌溶液清洗,最后用分離溶液使DNA與核酸吸附層脫離,從而獲得超純的DNA;
所述的DNA提取試劑各組分及物質濃度(摩爾/升)組成按終濃度體積為:
懸浮溶液:0.01-0.2mol/L?C4H11NO3,0.001-0.5mol/L?EDTA,0.0001-0.9mol/L?C15H28NaNO3,余量為去離子水;
離解溶液:0.5-10mol/L胍鹽,余量為去離子水;
清除溶液:0.1-10mol/L胍鹽,0.01-4mol/L?C4H11NO3,余量為乙醇和去離子水的混合溶液;
洗滌溶液:0.01-8mol/L?NaCl,0.001-3mol/L?C4H11NO3,余量為乙醇和去離子水的混合溶液;
分離溶液:0.01-10mol/L?EDTA,0.001-0.6mol/L?C4H11NO3,余量為去離子水。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述核酸吸附離心套管包括內層吸附管和外層收集管,其中,內層吸附管中含吸附介質層,外層套管為液體收集管,使用時將內層吸附管插入到外層收集管中。
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