[發明專利]一種青環海蛇抗菌肽Hc-CATH的改造體HC-15及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210327902.7
• 申請日: 2012-09-07
• 公開（公告）號: CN103665111A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 王義鵬;張淑敏;謝則平
• 申請（專利權）人: 山東國際生物科技園發展有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K38/10;A61P31/00
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技術領域

本發明涉及一種抗菌肽及其制備方法和應用，具體涉及一種青環海蛇(Hydrophis?cyanocinctus)抗菌肽Hc-CATH改造體抗菌肽HC-15及其制備方法和應用。

背景技術

Cathelicidins是一個具有多功能的抗菌肽家族，目前在哺乳類、鳥類、爬行類、兩棲類和魚類動物中均有發現。Cathelicidins具有廣譜高效的抗微生物活性，不僅對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、某些真菌以及病毒具有非常強的殺菌活性，而且對許多臨床耐藥細菌同樣具有作用。除此之外，cathelicidins還具有許多其他生物學活性，如對多種免疫細胞具有趨化作用、誘導肥大細胞脫粒和組織胺釋放、調節巨噬細胞轉錄、促進傷口愈合、誘導血管發生、誘導變異細胞系細胞凋亡和淋巴細胞活化等。由于具有如此眾多的活性，cathelicidins一直是國際上研究的熱點。針對cathelicidins的藥用開發則蘊含著巨大的臨床治療藥物制備價值。

隨著傳統抗生素的大規模和不恰當使用，微生物耐藥性問題變得日益嚴重，在臨床上已經出現了大量能夠廣泛耐受傳統抗生素的微生物，已有的抗生素對這些病原微生物無能為力。抗菌肽是一類天然的具有抗微生物活性的多肽，大多數抗菌肽分子量小于10KD，富含堿性氨基酸殘基，能夠形成兩親性的結構。大部分抗菌肽的殺菌機制是通過靜電相互作用吸引并結合到帶負電的細菌細胞膜表面，進一步在細菌細胞膜上形成跨膜的孔洞，導致細菌細胞內容物的外泄，從而導致細菌細胞的死亡。由于作用方式的不同，抗菌肽介導的殺菌作用遠遠快于傳統抗生素，并且不易使細菌產生耐受性。

目前，國外有許多公司正在進行cathelicidins家族抗菌肽的研究開發，已有多種cathelicidins家族抗菌肽及其改造體進入臨床試驗階段。如牛Indolicidin改造體MBI-226用于治療中心導管導致的血液感染，已進入臨床IIIb期。牛Indolicidin改造體MX-594AN用于治療痤瘡感染，已進入臨床IIb期試驗階段。豬protegrin改造體Iseganan用于治療腫瘤患者口腔感染，已進入臨床I期試驗階段。

海蛇屬于爬行綱蛇目眼鏡蛇科，一般生活于大陸架和海島周圍的淺水區，是一類海岸帶極具開發潛力的海洋經濟爬行動物。世界上約有50多種海蛇，中國有扁尾海蛇亞科和海蛇亞科共9屬15種。海蛇藥用在中國歷代醫書均有記載，其作為祛風燥濕、通絡活血、攻毒和滋補強壯等功效良藥，常用于風濕痹癥、四肢麻木、關節疼痛、疥癬惡瘡等癥。現代醫學研究表明：海蛇干具有抗炎、抗菌、抗病毒、鎮痛、改善微循環、提高免疫力等功能；海蛇膽具有顯著止咳，祛痰作用，用于咳嗽、哮喘等呼吸道疾病的治療；海蛇毒具有鎮痛、抗血栓、抗腫瘤等活性。海蛇所具有的廣泛的藥學活性，表明其具有極大的藥用開發潛力。但是與陸地蛇相比，目前國內外對海蛇的研究十分滯后，只有為數不多關于海蛇分類、生態、毒液成分和傳統藥學應用的文章報道。然而對海蛇cathelicidins家族抗菌肽的研究目前國內外仍是一片空白。

青環海蛇(Hydrophis?cyanocinctus)屬于眼鏡蛇科海蛇亞科海蛇屬，在遼寧、山東、江蘇、浙江、福建、臺灣、廣東、廣西、海南等省區沿海均有分布。但是目前關于青環海蛇cathelicidins家族抗菌肽的研究還沒有報道。

發明人將本發明的青環海蛇抗菌肽Hc-CATH改造體HC-15氨基酸全序列經NCBI蛋白質數據庫進行搜尋比對，未發現有任何相同多肽。

發明內容

本發明的目的在于一種青環海蛇(Hydrophis?cyanocinctus)抗菌肽Hc-CATH改造體抗菌肽HC-15及其制備方法和應用。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：

一種改造體抗菌肽，改造體抗菌肽為青環海蛇(Hydrophis?cyanocinctus)抗菌肽Hc-CATH的改造體HC-15，其是直鏈多肽，含有15個氨基酸殘基，且C-末端酰胺化，分子量1974.46Da，等電點12.61。

所述改造體抗菌肽為：纈氨酸-精氨酸-賴氨酸-苯丙氨酸-賴氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-精氨酸-精氨酸-纈氨酸-精氨酸-賴氨酸-絲氨酸-纈氨酸，且C-末端酰胺化。

改造體抗菌肽的應用，所述改造體抗菌肽HC-15用于制備抗微生物藥物的用途