[發明專利]一種高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法有效
| 申請號: | 201210320390.1 | 申請日: | 2012-08-31 |
| 公開(公告)號: | CN102888389A | 公開(公告)日: | 2013-01-23 |
| 發明(設計)人: | 季萬蘭;江波;沐萬孟;李曉卉;丁美琴;劉炯;劉知遠;韓曉明 | 申請(專利權)人: | 江蘇梁豐食品集團有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/90 | 分類號: | C12N9/90;C12R1/19 |
| 代理公司: | 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103 | 代理人: | 汪青 |
| 地址: | 215600 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高效 誘導 阿拉伯糖 異構酶 方法 | ||
1.一種高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法,其以乳糖操縱子質粒pET-22b(+)構建的L-阿拉伯糖異構酶重組菌為出發菌,利用誘導劑誘導L-阿拉伯糖異構酶的活性表達,其特征在于:所述的誘導劑至少包括D-半乳糖。
2.根據權利要求1所述的高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法,其特征在于:所述誘導劑為D-半乳糖與其它誘導劑的組合。
3.根據權利要求2所述的高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法,其特征在于:所述誘導劑為D-半乳糖與誘導劑IPTG的組合。
4.根據權利要求3所述的高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法,其特征在于:D-半乳糖的添加濃度為0.01~10mmol/L,誘導劑IPTG的添加濃度為0.1~1mmol/L。
5.根據權利要求4所述的高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法,其特征在于:D-半乳糖的添加濃度為0.1~1mmol/L。
6.根據權利要求1或4或5所述的高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法,其特征在于:將L-阿拉伯糖異構酶重組菌培養于LB培養基中,培養溫度為37±1℃,培養至600?nm光密度值為0.6時,添加誘導劑IPTG和D-半乳糖,在溫度15~40℃下進行誘導,誘導時間為0.5~10h。
7.根據權利要求1所述的高效誘導L-阿拉伯糖異構酶的方法,其特征在于:所述乳糖操縱子質粒pET-22b(+)構建的L-阿拉伯糖異構酶重組菌為含解纖維熱酸菌L-阿拉伯糖異構酶的大腸桿菌BL21(DE3)或含嗜熱脂肪芽孢桿菌L-阿拉伯糖異構酶的大腸桿菌BL21(DE3)。
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