[發明專利]一種凝膠柱的裝填方法

無效

• 申請號: 201210320062.1
• 申請日: 2012-08-31
• 公開（公告）號: CN103675169A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 趙岳星;姚立新;錢丙寅;楊慧
• 申請（專利權）人: 月旭材料科技（上海）有限公司
• 主分類號: G01N30/56
• 分類號: G01N30/56
• 代理公司: 隆天國際知識產權代理有限公司 72003
• 代理人: 于寶慶;劉春生

技術領域

本發明涉及一種裝填凝膠柱的方法，更具體地，本發明涉及一種裝填聚合物凝膠高壓液相色譜(HPLC)柱的方法。

背景技術

凝膠色譜法又稱作分子排阻色譜法，其是上個世紀六十年代初發展起來的一種快速、簡單的分離分析技術，主要用于高聚物的相對分子質量分級分析以及相對分子質量分布測試。作為凝膠色譜法的關鍵部件，有機聚合物凝膠色譜柱的傳統裝柱方法包括機械裝柱法和人工裝柱法。機械裝柱法是在橫流情況下，直接將凝膠漿灌注到柱中，由于沒有外壓，所以填料難以裝填得更緊密，從而導致色譜柱的柱效低、壽命短；人工裝柱方法，裝柱不穩定，往往不能一次成功，經常需要經常重裝，不僅工作量大，而且色譜柱的壽命和柱效也不高。

針對上述問題，本發明的發明人認真地研究了硅膠色譜柱的裝填方法，其裝填裝置如圖1所示，通過改進硅膠色譜柱的裝填工藝，并在大量實驗的基礎上完成了本發明。

發明內容

根據本發明的一個方面，提供一種裝填凝膠色譜柱的方法，該方法包括如下步驟：

(1)制備勻漿液：將凝膠粉加到去離子水中，充分潤濕之后，加熱煮沸2～3小時，得到勻漿液；

(2)連接裝填系統：將空柱管的上端連接到勻漿罐上，并在空柱管下端連接內徑為0.2～0.6mm的不銹鋼毛細管；

(3)在空柱管內注入約為空柱管體積1/3的去離子水，然后將所述勻漿液緩慢地加到勻漿罐中；

(4)啟動空壓機，壓入頂替液，并在5.5～8.5MPa的壓力下保持20～80分鐘，其中該頂替液是水和甲醇的混合物；及

(5)改用去離子水作為頂替液，并以1～3倍柱體積的量沖洗柱床，制得凝膠色譜柱。

在一優選實施方案中，上述步驟(1)中所述的凝膠粉和去離子水的重量比為1∶3～4。

在另一優選實施方案中，上述步驟(1)還包括濾除漂浮于水面的細小顆粒，然后使勻漿液自然沉降的步驟，并且重復該步驟2～4次。

在又一優選實施方案中，上述步驟(4)中所述的水和甲醇的混合物中，水和甲醇的體積比為3∶1～1∶3。

在再一優選實施方案中，前述凝膠粉為交聯葡聚糖。

在再一優選實施方案中，該交聯葡聚糖的重均分子量為1000～200000。

在再一優選實施方案中，該交聯葡聚糖為選自下列中的一種：Sephadex?G-10，Sephadex?G-15，Sephadex?G-25，Sephadex?G-50，Sephadex?G-75，Sephadex?G-100，及Sephadex?G-150。

實驗表明，根據本發明的方法制得凝膠色譜柱，不僅可以消除填料中的氣泡；使有機聚合物填料緊密地填充在柱床上；而且大大地提高了裝填工作的一致性。因此，根據本發明的方法獲得的色譜柱具有更高的柱效率和更長的使用壽命，同時也使裝填色譜柱的成功率由傳統方法的76％提高到90％以上。

附圖說明

為了更好地理解本發明的構思、特征和優點，下文中將參照附圖，更具體地說明本發明。在附圖中：

圖1是現有的裝填硅膠色譜柱的裝置的示意圖；及

圖2是本發明的裝填有機聚合物凝膠色譜柱的裝置的示意圖。

具體實施方式

考慮由于現有的有機聚合物凝膠色譜柱的裝填中不施加外壓，所以本發明人首先想到用硅膠色譜柱的裝填方法裝填聚合物凝膠色譜柱。而且，為了對裝填的聚合物凝膠施加更大的壓力，在本發明的一個實施方案中，本發明人在硅凝膠色譜柱裝填裝置中的空色譜柱下端的濾板之下加裝了一個內徑約1～5mm的不銹鋼毛細管，限制了溶劑的流出，從而可以增加裝填聚合物凝膠時色譜柱中的壓力，使得聚合物凝膠可以裝填得更緊密，進而提高色譜柱的效率。

在另一實施方案中，本發明人嘗試用體系比為3∶1～1∶3的水和甲醇作為頂替液，代替傳統方法采用的甲醇或乙醇，結果發現，這樣可以使聚合物凝膠裝填得更緊密。

在又一實施方案中，發明人一改傳統的勻漿液制備方法，而是在將凝膠粉加到去離子水中之后，將其加熱煮沸2～3小時。據信，這樣不僅可以使凝膠粉溶脹充分，而且可以排除其中的氣體，并殺死其中可能存在的細菌和/或微生物，從而使得所制備的色譜柱填料中沒有氣泡，并延長其使用壽命。