[發(fā)明專利]高特異性多個(gè)運(yùn)動(dòng)機(jī)能相關(guān)基因檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210316813.2
• 申請(qǐng)日: 2012-08-30
• 公開（公告）號(hào): CN102864223A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 步迅;夏子芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東百福基因科技有限公司;步迅;夏子芳
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 青島發(fā)思特專利商標(biāo)代理有限公司 37212
• 代理人: 耿霞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高特異性多個(gè)運(yùn)動(dòng)機(jī)能相關(guān)基因檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法，同時(shí)檢測(cè)4個(gè)運(yùn)動(dòng)機(jī)能相關(guān)基因，屬于生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

隨著人類基因組計(jì)劃的完成，后基因組計(jì)劃的全面展開，以基因工程為主導(dǎo)的生物技術(shù)在體育運(yùn)動(dòng)問題領(lǐng)域的應(yīng)用得到廣泛的關(guān)注。基因遺傳工程應(yīng)用于運(yùn)動(dòng)員選材是歷史必然、大勢(shì)所趨，它必將從根本上引起運(yùn)動(dòng)選材理論和方法的革命。運(yùn)用遺傳學(xué)的理論和方法進(jìn)行運(yùn)動(dòng)選材已經(jīng)有了初步進(jìn)展。與個(gè)體運(yùn)動(dòng)能力的相關(guān)多個(gè)基因位點(diǎn)已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)，遺傳工程應(yīng)用于運(yùn)動(dòng)選材的前景廣闊而緊迫目前較為成熟的運(yùn)動(dòng)人材基因篩選的相關(guān)位點(diǎn)包括：

1．ACE基因

目前人們普遍認(rèn)為ACE（血管緊張素轉(zhuǎn)化酶）水平和心血管的形態(tài)、功能密切相關(guān)。ACE基因的多態(tài)性是人耐力素質(zhì)優(yōu)劣的決定性因素之一，其作為一個(gè)有價(jià)值的遺傳標(biāo)志，有望成為科學(xué)選材的理想指標(biāo)。

腎素―血管緊張素系統(tǒng)（RAS）在心血管系統(tǒng)中作用顯著，如調(diào)節(jié)血壓、血容量、血管張力，引起血管壁增厚或心肌細(xì)胞肥大和非心肌細(xì)胞的增殖，是血壓和體液、電解質(zhì)平衡的主要調(diào)節(jié)因素之一。ACE是RAS酶/底物鏈反應(yīng)體系中的關(guān)鍵酶，ACE的作用是催化十肽血管緊張素I（Ang?I）轉(zhuǎn)變?yōu)榘穗牡难芫o張素II（Ang?II）。ACE的水平?jīng)Q定著RAS中Ang?II的生成量。臨床上認(rèn)為ACE為高血壓的致病因素之一。

分子遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)ACE基因位于第16內(nèi)含子的一段287bp的Alu序列的插入（I）/缺失（D）有多態(tài)性，使ACE基因有三種基因型：II(插入純合型)、ID（插入/缺失型）和DD（缺失純合型）。I使人體血液中的ACE水平較低，形式D起相反作用。II型的人，其耐力比擁有兩個(gè)D基因的人要強(qiáng)。I基因能增強(qiáng)肌肉吸收氧和營(yíng)養(yǎng)成份的能力，助于增強(qiáng)人的有氧耐力。有實(shí)驗(yàn)證明在不同基因型的個(gè)體中，機(jī)體局部耐力機(jī)能的改善有明顯的個(gè)體差異：在對(duì)訓(xùn)練的敏感度上，II純合子比DD純合子大l1倍。

2．CKMM基因

肌酸激酶(CK)是Cr+MgATP+H——PCr+MgADP反應(yīng)的關(guān)鍵酶。CK與磷酸肌酸組成肌酸一磷酸肌酸穿梭系統(tǒng)，在細(xì)胞內(nèi)的作用：一是，在高能量需求時(shí)作為“暫時(shí)的能量緩沖系統(tǒng)”保持ATP／ADP的比率；二是，作為能量轉(zhuǎn)運(yùn)單位，將能量從產(chǎn)生部位轉(zhuǎn)運(yùn)到利用部位。肌型肌酸激酶是一種組織特異性酶，主要在骨骼肌中表達(dá)，心肌中也有少量表達(dá)。肌肉中CKMM主要集中在M線附近，其主要功能是在肌球蛋白頭部生成高濃度的ATP，為肌肉收縮及運(yùn)動(dòng)提供能量，CKMM也存在肌質(zhì)網(wǎng)Ca?ATP酶附近，可能影響Ca的再聚集，從而影響肌肉的工作能力。研究表明，人的CKMM基因的多態(tài)性與耐力以及耐力訓(xùn)練效果有關(guān)。

CKMM基因多態(tài)性的三種基因型分別為：AA型、GG型和雜合子AG型。研究結(jié)果顯示：與耐力訓(xùn)練前相比，訓(xùn)練后相通亞極限強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)，AA、AG型的人運(yùn)動(dòng)能力提高顯著，但GG型訓(xùn)練后各種指標(biāo)改變不明顯。因此GG型基因?yàn)槟土τ?xùn)練中最不敏感，攜帶A等位基因的AA型、AG型人對(duì)耐力訓(xùn)練的敏感性顯著高于和GG型。

最新研究表明在高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后出現(xiàn)的肌痛、肌酸激酶增高等橫紋肌溶解癥狀，與ACE與CKMM基因有密切的關(guān)系。運(yùn)動(dòng)后與D等位基因（ACE基因）和G等位基因（CKMM基因）的個(gè)體更易出現(xiàn)肌酸激酶高反應(yīng)。而同時(shí)具有DD基因型（ACE基因）和GG基因型（CKMM基因）的人，會(huì)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)后肌酸激酶異常升高，D+G基因型有相加作用。

3．促紅細(xì)胞生成素（EPO）基因

EPO作用于紅骨髓造血干細(xì)胞，促使干細(xì)胞分裂、分化，生成紅細(xì)胞的過程稱為“促紅細(xì)胞生成”，這是機(jī)體產(chǎn)生新生紅細(xì)胞的唯一途徑。EPO對(duì)人體生理作用是這樣的重要，以至于20年前就把它作為第一個(gè)造血因子來克隆用于臨床治療。