[發(fā)明專利]小鼠胎肝細胞PL08及其建立方法和在臍帶血造血干細胞培養(yǎng)與增殖中的應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210316523.8 | 申請日： | 2012-08-30 |
| 公開（公告）號： | CN103289951A | 公開（公告）日： | 2013-09-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李鵬;劉志新 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院 |
| 主分類號： | C12N5/073 | 分類號： | C12N5/073;C12N5/0789 |
| 代理公司： | 廣州三環(huán)專利代理有限公司 44202 | 代理人： | 劉孟斌 |
| 地址： | 510000 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 小鼠 肝細胞 pl08 及其 建立 方法 臍帶血 造血 干細胞 培養(yǎng) 增殖 中的 應(yīng)用 | ||
1.小鼠胎肝細胞PL08CCTCC?No.C201297。
2.小鼠胎肝細胞PL08的建立方法：
a.取C57/BL6小鼠第11天的胎肝，用帶有27G針頭的無菌注射器反復(fù)吹打，以使組織解離，分散為單個細胞；
b.用紅細胞裂解液去除紅細胞后，將細胞培養(yǎng)在0.1％明膠包被過的細胞培養(yǎng)板上，培養(yǎng)基成分為：aMEM培養(yǎng)基，添加10％-15％的胎牛血清；
c.經(jīng)過4到5天的培養(yǎng)，去除上清，將貼壁細胞用0.05％的胰酶消化下來，常規(guī)方法擴大培養(yǎng)、傳代，每次傳代過程中保留30％的原培養(yǎng)液，添加70％的新鮮培養(yǎng)液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的建立方法，其特征在于細胞培養(yǎng)、傳代的溫度為37攝氏度，PH值為7.2。
4.小鼠胎肝細胞PL08在臍帶血造血干細胞培養(yǎng)中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于在體外培養(yǎng)和增殖臍帶血造血干細胞。
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