[發(fā)明專利]一種微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210308939.5
• 申請日: 2012-08-28
• 公開（公告）號: CN102839127A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陸向紅;計建炳;竇曉;盧美貞
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C11B1/10;C11B1/04;C11B1/00;C12R1/89
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于所述方法為：

（1）將新鮮微藻細胞以體積分數(shù)5%的接種量接種在相應的微藻培養(yǎng)液中，通入空氣，在自然光照下，5~40℃培養(yǎng)至對數(shù)生長期后，再在同樣條件下培養(yǎng)1~33d，獲得藻液；

（2）在步驟（1）獲得的藻液中加入堿性水溶液調(diào)節(jié)pH值為10~13，或在步驟（1）獲得的藻液中加入酸性水溶液調(diào)節(jié)pH值為1~5，室溫靜置1~5d使藻液分層，獲得上層清液和下層沉淀，將下層沉淀過濾，取濾餅即獲得藻泥，將藻泥采用有機溶劑A浸提、索氏抽提或酸法提取處理，獲得所述藻油；所述有機溶劑A為下列之一：乙醇、乙醚、乙酸乙酯或石油醚；

（3）將步驟（2）的上層清液調(diào)節(jié)pH至7~8，獲得調(diào)節(jié)pH值后的上層清液，并檢測上層清液組成，將調(diào)節(jié)pH值后的上層清液各個組成補足至相應微藻培養(yǎng)液組成，獲得再生微藻培養(yǎng)液，循環(huán)用于微藻培養(yǎng)。

2.如權(quán)利要求1所述微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于步驟（1）所述微藻為淡水微藻或海洋微藻。

3.如權(quán)利要求1所述微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于步驟（1）所述微藻為下列之一：眼擬點微綠球藻、杜氏鹽藻、葡萄藻或小球藻。

4.如權(quán)利要求1所述微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于所述方法為：

（1）將新鮮微藻細胞以體積分數(shù)5%的接種量接種在相應的微藻培養(yǎng)液中，通入空氣，在自然光照下，5~40℃培養(yǎng)至對數(shù)生長期后，再在同樣條件下培養(yǎng)1~15d，獲得藻液；所述微藻為海洋微藻；所述相應的微藻培養(yǎng)液為改良F/2培養(yǎng)液，終濃度組成為：NaNO₃25~1350mg/L、NaH₂PO₄·2H₂O5~270mg/L、Na₂SiO₃·9H₂O?20mg/L、Na₂EDTA?4.36mg/L、FeCl₃·6H₂O3.16mg/L、CuSO₄·5H₂O?0.01mg/L、ZnSO₄·7H₂O?0.023mg/L、CoCl₂·6H₂O0.012mg/L、MnCl₂·4H₂O?0.18mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O?0.07mg/L、VB₁0.1μg/L、VB₂0.5μg/L、生物素0.5μg/L，溶劑為水，pH值為7~8；

（2）在步驟（1）獲得的藻液中加入堿性水溶液調(diào)節(jié)pH值為10~13，或在步驟（1）獲得的藻液中加入酸性水溶液調(diào)節(jié)pH值為1~5，室溫靜置1~5d使藻液分層，獲得上層清液和下層沉淀，將下層沉淀過濾，取濾餅即獲得藻泥，將藻泥采用有機溶劑B浸提、索氏抽提或酸法提取處理，獲得所述藻油；所述有機溶劑B為下列之一：乙醇、乙醚、乙酸乙酯或石油醚；

（3）將步驟（2）的上層清液調(diào)節(jié)pH至7~8，獲得調(diào)節(jié)pH值后的上層清液，在調(diào)節(jié)pH值后的上層清液中加入硝酸鈉和磷酸二氫鈉，使硝酸鈉的終濃度為25~1350mg/L、磷酸二氫鈉的終濃度為5~270mg/L，獲得再生后的改良F/2培養(yǎng)液，循環(huán)用于微藻培養(yǎng)。

5.如權(quán)利要求4所述微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于步驟（1）所述微藻為眼擬點微綠球藻。

6.如權(quán)利要求4所述微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于步驟（1）所述培養(yǎng)溫度為25~30℃。

7.如權(quán)利要求4所述微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于步驟（1）所述改良F/2培養(yǎng)液中NaNO₃的終濃度為225~1350mg/L，相應氮磷質(zhì)量比為4:1。

8.如權(quán)利要求4所述微藻培養(yǎng)及采收耦合快速積累藻油的方法，其特征在于步驟（2）所述堿性水溶液為氫氧化鈉水溶液或氫氧化鉀水溶液，所述酸性水溶液為硫酸水溶液或鹽酸水溶液。