[發明專利]一種雞傳染性支氣管炎病毒減毒疫苗株及其應用

無效

• 申請號: 201210308877.8
• 申請日: 2012-08-27
• 公開（公告）號: CN102851257A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 侯艷霞;張超;董文龍;寇芮
• 申請（專利權）人: 上海啟盛生物科技有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/215;A61P31/14;C12N7/08;C12R1/93
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

技術領域

本發明涉及生物工程和免疫領域，具體地，為一種雞傳染性支氣管炎病毒(Infectious?Bronchitis?virus，IBV)的減毒株、減毒株的衍生毒株以及其在IBV防治接種、疫苗組合物制備中的應用。

背景技術

雞傳染性支氣管炎(Avian?Infectious?Bronchitis，IB)是IBV(Infectious?Bronchitis?virus，IBV)引起的一種急性、高度接觸傳染性傳染病。IBV自然感染主要發生于雞，各種年齡的雞都易感。傳染性支氣管炎病毒主要侵害雞的呼吸道，腎臟和輸卵管。臨床癥狀多見于六周齡以內的雞，感染率高，但死亡率低。肉雞感染之后，主要降低食物轉換率、增重緩慢、同時可能出現繼發感染，造成屠宰合格率低。10日齡以內的雌性雛雞感染后，往往導致永久性輸卵管破壞；但也危害育成雞和產蛋雞群，使之抵抗力降低、產蛋量及蛋的品質下降。

目前世界上流行著許多血清型/基因型的IBV。過去IBV的分型是按血清中和反應來確定血清型的。各血清型之間無交叉保護作用或交叉保護作用很低。隨著分子生物學技術的發展，目前常常用S1蛋白的基因的核苷酸和氨基酸序列的比較來確定其基因型。在所有已知血清型中，馬薩諸塞血清型(Massachusetts，以下簡稱Mass或M41)分布和流行最廣，幾乎世界各地有IBV的國家均有該血清型的流行。

根據國內外的研究報道，IBV不同血清型/基因型的分布具有明顯的地域特征。Pan?J.Y.等從青島地區分離并鑒定出了一種腺胃型IBV毒株，命名為QX株(1999，Genebank?access?No.:AF193424)。后來在2004年，劉勝旺等報道在我國免疫雞群和非免疫雞群中也分離到QX基因型毒株，但病雞多以腎炎為主。最近幾年除呼吸道癥狀和腎臟變化外，雌性雛雞感染后輸卵管出現囊腫也非常常見。我國大陸當前同時流行多個血清型/基因型的IBV毒株，其中類QX型毒株(簡稱QX-like，亦稱LX4-type)是最主要的優勢流行株，比例超過50%，部分地區甚至高達75%。從2003年以來，類QX基因型IBV已在許多國家廣泛流行，如荷蘭、比利時、法國、德國、意大利、俄羅斯、韓國等，除呼吸道癥狀和腎臟變化外，雌性雛雞感染后輸卵管常出現囊腫。

美國常用的IBV疫苗株：1)Mass-type血清型如H120或Ma5；2)Delaware血清型如DE072；3)Georgia血清型如GA98；4)Connecticut血清型；5)Arkansas血清型等。歐洲常用的IBV疫苗株：1)Mass-type血清型如H120或Ma5或H52；2)4/91或793B血清型；3)D274血清型；4)D1466血清型；5)類QX基因型等。

我國廣泛使用的疫苗均屬于Mass-type血清型的毒株，包括H120、H52、Ma5和W93。當前國內流行毒株除Mass-type血清型外，還有相當一部分在遺傳進化關系上與Mass-type疫苗毒株存在較大差異，因此我國已有疫苗不能有效地預防IB流行毒株的攻擊。研究開發具有較好保護力的新血清型或基因型的疫苗，同時還能與Mass-type血清型IB減毒疫苗聯合應用顯得尤為重要，本發明研究開發了一種新的雞傳染性支氣管炎減毒疫苗株，解決了以上所述問題。

發明內容

本發明的目的就是提供一種可用于保護禽類宿主以抵抗傳染性支氣管炎的減毒病毒株及其應用。

在本發明的第一方面，提供了一種雞傳染性支氣管炎病毒(Infectious?Bronchitis?virus，IBV)的減毒株，所述減毒株是雞傳染性支氣管炎減毒疫苗株IBV-KL05，保藏號為CCTCC.V201232。

在本發明的第二方面，提供了衍生自第一方面所述的雞傳染性支氣管炎病毒的減毒株的衍生病毒株。

在另一優選例中，所述衍生病毒株具有以下一個或多個特性：

(a)低毒力：毒力與CCTCC.V201232的毒力相近或相同；

(b)所述的衍生病毒株中S1基因的第1-1643位的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.:1所示；

(c)所述衍生病毒株表達的S1蛋白的第54位氨基酸為異亮氨酸(Ile)；

(d)所述衍生病毒株表達的S1蛋白的第1-547位如SEQ?ID?NO.:2所示。

本發明的減毒株和所述衍生病毒株安全性好：可用于肉雞、蛋雞和種雞的免疫接種；可用于一日齡或一日齡以上(如2-9日齡)雞的免疫接種；和/或可用于蛋雞和種雞在產蛋期間的免疫接種。