[發明專利]豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法無效
| 申請號： | 201210304135.8 | 申請日： | 2012-08-23 |
| 公開（公告）號： | CN102977193A | 公開（公告）日： | 2013-03-20 |
| 發明（設計）人： | 吳紅云;李建正;徐進;李厚偉 | 申請（專利權）人： | 鄭州后羿制藥有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/01 | 分類號： | C07K14/01;C07K1/16 |
| 代理公司： | 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛愛周 |
| 地址： | 451162 河南*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 圓環 病毒 orf2 基因 表達 分泌 蛋白 純化 方法 | ||
1.一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，具體步驟如下：
1）取菌體，超聲波破碎，離心，取上清液；
2）上樣，緩沖液A洗去層析柱中未結合蛋白；
3）依次用緩沖液B1、B2、B3、B4、B5和B6洗去雜質蛋白；
4）依次用緩沖液C1、C2、C3、C4、C5、C6、D1、D2和D3洗脫目的蛋白，即得含目的蛋白的流穿液。
2.根據權利要求1所述的一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，所述的緩沖液A為：
0.2M?Na2HPO4
0.2M?NaH2PO4
0.15M?NaCl。
3.根據權利要求1所述的一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，所述的緩沖液B1為：
0.2M?Na2HPO4
0.2M?NaH2PO4
0.15M?NaCl
5mM?咪唑。
4.根據權利要求1所述的一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，所述的緩沖液B6為：
0.2M?Na2HPO4
0.2M?NaH2PO4
0.15M?NaCl
80mM?咪唑。
5.根據權利要求1所述的一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，所述的緩沖液C4為：
PH7.0
0.2M?Na2HPO4
0.2M?NaH2PO4
0.15M?NaCl。
6.根據權利要求1所述的一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，所述的緩沖液D2為：
PH7.0
0.2M?Na2HPO4
0.2M?NaH2PO4
0.15M?NaCl
200mM?咪唑。
7.根據權利要求1所述的一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，咪唑濃度為5mM和80mM的緩沖液B1和B6能有效去除雜質蛋白。
8.根據權利要求1所述的一種豬圓環病毒ORF2基因原核表達分泌蛋白的純化方法，其特征在于，緩沖液D2洗脫目的蛋白的純度為85%。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于鄭州后羿制藥有限公司，未經鄭州后羿制藥有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201210304135.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
