[發明專利]一種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑及制備方法

無效

• 申請號: 201210303517.9
• 申請日: 2012-11-13
• 公開（公告）號: CN102911893A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 朱明;夏振強
• 申請（專利權）人: 淮海工學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;A23K1/18;C12R1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種用于水產養殖益生菌CW9的活菌干粉制劑，本發明還涉及該干粉制劑的制備方法。

背景技術

中國專利201010572426.6，公開號：CN?102485884A公開了一種節桿菌CW9及其用途，該菌可用于提高海水甲殼類幼體的變態率與存活率。對多種甲殼類動物幼體具有益生作用，其生產和儲運方法簡單，使用方法簡便；該益生菌只在甲殼類動物蚤狀一期投放，即可提高和穩定幼體后期的變態率，從而大幅度提高苗種產量。

現有技術中益生菌制劑的制備工藝較多，但都不適合甲殼類水產養殖動物幼體的使用。例如，有內服的益生菌制劑是固態發酵后單獨或與飼料混合后干燥、粉碎，這樣的產品顆粒太大，對于濾食的甲殼類水產養殖動物幼體，無法取食。或者是多種益生菌制成片劑潑灑到水體中，又或者更多的是用于調節水質。有的則是將發酵液直接包裝成水劑，或離心后做成濃縮的水劑。無論哪種水劑，都不便于運輸，且保藏周期短，保藏過程死亡率很高并且容易感染雜菌。實驗室規模可以用以用冷凍干燥的方法生產菌劑，但凍干菌粉有很多不利，凍干耗時，價格昂貴，冷凍濃縮轉化和儲藏費用高，解凍過程菌種存貨量減少。

水產養殖益生菌CW9已于2010年10月8日交中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏編號為CGMCC?NO.4197。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑及制備方法，可以有效提高活菌干粉制劑的存活率。

為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：一種水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑：

以體積計的4份發酵液離心后去上清液，沉淀的菌泥加入1份保護劑，重新懸浮，噴霧干燥，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑；

所述的保護劑按照以下質量比配制：

明膠0.1-0.2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80?1-3份，司班-60?1-3份，水100份。

優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制：

明膠0.15份，脫脂奶粉25份，吐溫-80?3份，司班-60?2份，水100份。

優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制：

明膠0.1份，脫脂奶粉25份，吐溫-80?2份，司班-60?2份，水100份。

優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制：

明膠0.2份，脫脂奶粉20份，吐溫-80?3份，司班-60?2份，水100份。

優化的方案中，所述的保護劑按照以下質量比配制：

明膠0.1份，脫脂奶粉30份，吐溫-80?3份，司班-60?3份，水100份。

一種制備上述制劑的制備方法，包括以下步驟：

一、制備發酵液；

二、制備保護劑，所述的保護劑按照以下質量比配制：

明膠0.1-0.2份，脫脂奶粉20-30份，吐溫-80?1-3份，司班-60?1-3份，水100份，保護劑的配制方法為攪拌混合；

三、以體積計的4份發酵液，7000rpm離心8min后去上清液，沉淀的菌泥加入1份保護劑，重新懸浮；

四、噴霧干燥，入口溫度100℃，出口溫度65℃，流量為300-400ml/h，收集噴霧干燥后的干粉菌劑；

通過上述步驟，得到水產養殖益生菌CW9活菌干粉制劑。

步驟一中，發酵培養基為葡萄糖8g/L，蛋白胨5g/L，酵母膏3g/L，氯化鈉2g/L，pH7.0，115℃滅菌20min，種子培養基與發酵培養基相同；

擴大培養，用隔夜培養的斜面接種250ml搖瓶，內置100ml種子培養基，37℃，搖床180轉/分鐘，培養23小時；

發酵，接種量3％，通氣比1∶0.8，攪拌轉速300轉/分鐘，37℃，培養18小時。

步驟二中，優化的方案為，所述的保護劑按照以下質量比配制：

明膠0.15份，脫脂奶粉25份，吐溫-80?3份，司班-60?2份，水100份。

干粉制劑活化時，干粉制劑與活化液質量體積比1∶10g/ml，活化液中糖的質量-體積濃度20-60g/L，活化溫度32-42℃。

優化的方案中，干粉制劑活化時，干粉制劑與活化液質量體積比1∶10g/ml，即1克干粉制劑需要10毫升活化液進行活化，活化液中糖的質量-體積濃度為40g/L，活化溫度37℃。