[發明專利]酶法合成5-羥基色氨酸的方法無效
| 申請號: | 201210303424.6 | 申請日: | 2012-08-23 |
| 公開(公告)號: | CN102808008A | 公開(公告)日: | 2012-12-05 |
| 發明(設計)人: | 高智慧;丁國鈺 | 申請(專利權)人: | 天津啟仁醫藥科技有限公司 |
| 主分類號: | C12P13/04 | 分類號: | C12P13/04;C12R1/19;C12R1/125 |
| 代理公司: | 天津佳盟知識產權代理有限公司 12002 | 代理人: | 侯力 |
| 地址: | 300457 天津市濱海新區開發區海*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 合成 羥基 色氨酸 方法 | ||
1.一種色氨酸酶催化5-羥基吲哚和L-半胱氨酸合成5-羥基色氨酸的方法,其特征在于該方法以色氨酸酶為酶源,以5-羥基吲哚和L-半胱氨酸為底物,酶促反應液中,底物5-羥基吲哚的加入量為5至20g/L,L-半胱氨酸的加入量為6至24g/L,酶源的添加量為2000至8000U/L,在40至60℃下,pH7至9,經酶法轉化反應3h至12h,生產L-5-羥基色氨酸。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述的色氨酸酶來自大腸桿菌基因工程重組菌BL21(DE3)-pET21a(+)-tnaA的發酵菌體細胞或裂解液,或枯草芽孢桿菌基因工程菌WB600-pWB980-tnaA的發酵液。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于酶促反應液中還包括輔酶磷酸吡哆醛,磷酸吡哆醛的加入量為0.005至0.02g/L。
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于輔酶磷酸吡哆醛的用量優選為0.015g/L。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法,其特征在于:酶促反應液中,底物5-羥基吲哚的用量優選為15g/L,底物L-半胱氨酸的用量優選為18g/L,酶源的添加量優選為6000U/L,,優選轉化溫度為45℃,優選轉化pH8,優選轉化時間12h。
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