[發(fā)明專利]一種牡丹組織培育方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210297136.4
• 申請(qǐng)日: 2012-08-20
• 公開（公告）號(hào): CN103621399A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 閻立燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 閻立燕
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種花卉組培方法，屬于植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，具體的說是一種牡丹組織培育方法。

背景技術(shù)

牡丹原產(chǎn)于中國西部秦嶺和大巴山一帶山區(qū)，為多年生落葉小灌木，生長緩慢，株型小。牡丹是我國特有的木本名貴花卉，素有“國色天香”、“花中之王”的美稱，長期以來被人們當(dāng)做富貴吉祥、繁榮興旺的象征。牡丹以洛陽牡丹、菏澤牡丹最富盛名。牡丹根皮入藥，名曰“丹皮”，可作為盆景植物觀賞，花朵顏色眾多，有粉色，紅色，白色等等，粉色以粉中冠，白色以景玉較為出名。牡丹不僅有觀賞價(jià)值，而且還具有很高的藥用價(jià)值。將牡丹的根加工制成“丹皮”，是名貴的中草藥。

目前公知的就牡丹栽培方法是采用扦插法、壓條法、分株和播種法進(jìn)行繁殖，在歐美及日本等地區(qū)對(duì)梔子屬植物的分類、栽培及育種等方面有較為系統(tǒng)深入的研究，而我國對(duì)梔子屬種質(zhì)資源的利用和開發(fā)力度尚顯不足。在國內(nèi)各類文獻(xiàn)資料中只有少量的關(guān)于芍藥屬種質(zhì)資源及園林應(yīng)用、觀賞用梔子品種的組織培養(yǎng)等方面的報(bào)到，而關(guān)于牡丹的組織培養(yǎng)及種植的全套種植方法則未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種牡丹組織培育方法，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)沒有牡丹全套種植方法，從而設(shè)計(jì)研究出操作簡單，繁殖率高，可大量生產(chǎn)牡丹試管苗的培育方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所述一種牡丹組織培育方法，其特征在于：將牡丹外植體消毒清洗，經(jīng)過愈傷組織誘導(dǎo)與分化，不定芽增殖，不定根誘導(dǎo)，煉苗；其具體技術(shù)方案如下：

a.外植體的選擇和消毒：選用當(dāng)年新發(fā)的莖尖，剪下莖尖經(jīng)水洗，在超凈工作臺(tái)上用70％的乙醇處理10s，再用0.1％升汞消毒，浸泡并振蕩6～8min，無菌水清洗4～6次，用濾水紙吸干水分備用；

b.培養(yǎng)：將消毒后的牡丹莖尖剪成小塊，形成愈傷組織接種在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天，培養(yǎng)溫度為20～25℃，光照強(qiáng)度2000Lux，每天光照14h，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)與分化；分化形成叢芽，培養(yǎng)的不定芽單個(gè)切開轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基上增殖培養(yǎng)，形成增殖體的幼苗轉(zhuǎn)接到1/2MS+IAA?0.2mg/L的培養(yǎng)基中，25～30天即有愈傷組織分化形成的芽叢；

c.生根培養(yǎng)：將大而健壯的芽轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基MS+IBA?0～0.05mg/L?15～21天生根；

d.煉苗：是將試菅苗從組培室取出后置于溫棚中，放置5～7天，取出幼苗洗凈培養(yǎng)基后移植在裝有腐質(zhì)土和泥炭1∶1并加少許腐質(zhì)葉為基質(zhì)的營養(yǎng)袋內(nèi)，澆水，在1000～2000Lx中光照8～12h，濕度大于70％條件下練苗1個(gè)月，當(dāng)葉達(dá)6～10片，高達(dá)6～8cm時(shí)移栽種植；

e.天然條件下進(jìn)行種植，選擇海拔800～2500m，滿足日照年平均6h/日、年平均最高溫度不高于18℃、月平均最高溫度在11～23℃、最低可達(dá)0℃的條件；滿足地下5cm土溫年平均最高溫度不高于16℃、月平均最高溫度在9～20℃、最低可達(dá)9℃以下的條件。

所述愈傷組織誘導(dǎo)接種在MS培養(yǎng)基加含NAA0.2～0.3mg/L培養(yǎng)基上，光照10～16h，濕度大于70％條件下直接誘導(dǎo)產(chǎn)生叢芽，25～30天開始萌動(dòng)；再經(jīng)8～14天有叢芽出現(xiàn)；7～15天叢芽長葉。

所述不定芽增殖接種在1/2MS+IBA?0.2mg/L的培養(yǎng)基中，25～30天便可形成幼苗；增殖培養(yǎng)產(chǎn)生的新叢芽，葉變綠，2～3cm時(shí)，進(jìn)一步轉(zhuǎn)接進(jìn)行增殖培養(yǎng)或繼代培養(yǎng)。

所述生根培養(yǎng)是接至生根培養(yǎng)基MS+NAA?0～0.05mg/L?15～21天生根，練苗后移栽。

本發(fā)明所述的一種牡丹組織培育方法，有益效果在于：可獲得大批組培苗滿足種植需要，成活率達(dá)95.5％，既可成批培育又可全面積種植組培苗，并且提早二年獲得無公害藥材，具有實(shí)用價(jià)值。

具體實(shí)施方式

通過本發(fā)明的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再做進(jìn)一步的詳細(xì)說明

實(shí)施例1：

1.外植體材料的采取和處理：

選擇牡丹6月生長茂盛無病的母株新發(fā)幼嫩莖尖葉為外殖體材料，采集野生或家種牡丹全株移種在花盒中，用清水洗葉，待新葉長出，從母株上剪下活莖尖用自來水沖洗15min，除去葉表面的塵土和絨毛，將莖尖放入70％的乙醇中翻轉(zhuǎn)20s，除去葉表面的蠟質(zhì)物后用清水沖洗葉面除去乙醇，放入0.1％升汞液中浸泡15min消毒，無菌水洗凈后剪成1cm²小方塊，葉背面平放于培養(yǎng)基中，每瓶放4塊外植體，蓋緊瓶蓋，用保鮮袋封好瓶口，在無菌操作臺(tái)上完成接種；

2.愈傷組織誘導(dǎo)與分化，不定芽增殖和不定根誘導(dǎo)：