[發明專利]紫丁香蘑深層發酵的菌絲體提取物的提取方法及其在卷煙中的應用

有效

• 申請號: 201210295820.9
• 申請日: 2012-08-16
• 公開（公告）號: CN102823937A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 郭國寧;劉冰;張耀華;岳海波
• 申請（專利權）人: 湖北中煙工業有限責任公司;武漢市黃鶴樓科技園有限公司
• 主分類號: A24B15/20
• 分類號: A24B15/20;C11B9/02
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 馬輝

技術領域

本發明涉及一種煙用微生物香料的復合提取和應用，具體涉及一種紫丁香蘑深層發酵的菌絲體提取物的提取方法及其在卷煙中的應用。

背景技術

紫丁香蘑（Lepista?nuda），又稱裸口蘑，紫晶蘑，俗稱米湯蘑，屬擔子苗綱(Basidiomycetes)傘菌目口蘑科(Tricholomataceae)香蘑屬(Lepista)真菌，其子實體菌柄呈紫丁香色，具有非常濃郁香氣，在中國主要分布于吉林、黑龍江、遼寧、湖北、山西、青海、福建等省。紫丁香蘑在歐洲是一種與松茸、牛肝菌齊名的珍稀食藥用菌，其中富含多種抗菌抑菌及抗氧化成分，可防止血管硬化，并可用于腎臟病、膽石、糖尿病、肝硬化等疾病的治療。目前紫丁香蘑主要應用于食用和藥用上，對其水提物和醇提物的充分利用還未做深入研究，并且，紫丁香蘑揮發油和提取物在卷煙中作為香料原料的應用尚未見報道。

菌絲體是食用菌的營養器官。相當于綠色植物的根、莖、葉。它生長在基質中，分解基質，吸收營養，能從基質中吸收水分、無機鹽和有機養分，以滿足其生長發育的需要。菌絲體主要功能是從死亡的有機質中分解、吸收、轉運養分，以滿足菌絲增殖和子實體生長發育的需要，在食用菌生產中，菌絲體充分生長是獲得豐收的物質基礎。

長期以來，植物一直是天然煙用香料的主要來源。但由于香料植物的產量受季節、氣候、病害等因素的影響較大，以致原料供應不穩定。尤其是近年來，天然香料的需求急劇增大，使得香料植物資源日漸枯竭，其價格也日益高漲，因此，尋找價廉、資源豐富、供應穩定的產香原料成為目前煙用香料開發研究的迫切需求。紫丁香蘑等珍稀食藥用菌含有一系列多樣性極為豐富的香味化合物，有望成為天然煙用香料的新來源。然而近年來，市場對紫丁香蘑的需求不斷增加，野生資源逐漸枯竭，而人工栽培產量小且不穩定，因此在香料行業中的應用并不多見。菌絲體深層發酵（Submerged?Fermentation,?SmF）技術是一種快速獲取擔子菌原料的生物技術，其生產周期短，更適合大規模工業生產。從發酵產物中提取煙用香料，不僅產量穩定，而且成本低廉。近年來，歐美等國已從法律上承認發酵生產獲得的香料也屬于天然香料的范疇，因而這方面的研究受到廣泛重視。目前，尚未見將紫丁香蘑深層發酵的菌絲體提取物用于煙用添加劑的報道。

發明內容

針對現有技術的上述不足，本發明要解決的技術問題是提供一種紫丁香蘑深層發酵的菌絲體提取物的提取方法及其在卷煙中的應用。采用液體深層發酵技術獲得紫丁香蘑菌絲體，作為提取物的原料來源，再用不同提取方法和處理步驟從紫丁香蘑菌絲體中依次得到提取物及其在卷煙中的應用。

為解決上述技術問題，本發明所設計的一種紫丁香蘑深層發酵的菌絲體提取物的提取方法，該提取方法步驟包括：

1）將紫丁香蘑按體積比5~15%接種于發酵培養基，在溫度25~30℃，

通氣量為0.8~1.0dm³/min，轉速100~150r/min條件下，培養3~5d，進行深層發酵獲得紫丁香蘑菌絲體發酵混合物；

2）將步驟1）中紫丁香蘑菌絲體發酵混合物進行水蒸汽蒸餾提取揮發油至完全，得到淺紅色透明油狀物，

3）將步驟2）中淺紅色透明油狀物溶解到80~100倍量重量的65~75%乙醇中，得到淺紅色透明一級提取物。

4）將步驟2）中淺紅色透明油狀物過濾，分離得到濾液和濾渣；向濾渣加入5~15倍量重量的水進行回流提取1~3h后過濾，合并兩次提取的濾液，濃縮至密度為0.8~1.2g/mL的溶液，攪拌中加入4~6倍量重量90~95%的乙醇，靜置3~6h，過濾，得到淺棕色液體二級提取物，其pH值為6.5~7.0；

進一步地，所述步驟1）將紫丁香蘑按體積比5~10%接種于發酵培養基，在溫度25~28℃，通氣量為0.8~1.0dm³/min，轉速100~120r/min條件下，培養3~5d。更優選方案為將紫丁香蘑按體積比8%接種于發酵培養基，在溫度26℃，通氣量為1.0dm³/min，轉速120r/min條件下，培養4d。

再進一步地，所述1）中發酵培養基的配方為：馬鈴薯200~250g，加入水1000ml，100℃蒸煮20分鐘，雙層紗布過濾馬鈴薯蒸煮液，添加5~8g麩皮，食用蔗糖15~30g，硫酸錳1~2.5g，硫酸鎂1~2.5g。

上述紫丁香蘑菌絲體提取物在卷煙中的應用，將提取物按照煙絲重量的0.001～0.10%的比例進行加香或者加料。