[發(fā)明專利]微量蛋白檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210294634.3
• 申請日: 2012-08-17
• 公開（公告）號: CN102788882A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭煥巍;李華濤;陳亞球
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市錦瑞電子有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 深圳市科吉華烽知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 44248
• 代理人: 胡吉科

1.一種微量蛋白檢測方法，其特征在于，包括：

配置緩沖液:配置抗血清處理液、配置反應(yīng)緩沖液;

抗血清處理：采用抗血清處理液將抗血清稀釋到1-2mg/ml，室溫放置后，放置2-8℃溫度環(huán)境進行保存；

反應(yīng)操作：在反應(yīng)器皿中加入反應(yīng)緩沖液，然后加入檢測樣本，并加入抗血清處理方法處理后的抗血清形成反應(yīng)溶液；

反應(yīng)分析：通過蛋白分析儀對反應(yīng)溶液進行測試，讀取檢測樣本的反應(yīng)幅度；

標準曲線擬合：利用不同濃度的校準液定出標準曲線，并進行非線性擬合。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：所述抗血清處理過程中，采用抗血清處理液將抗血清稀釋到1-2mg/ml后，室溫放置12-24小時后，然后放置4℃冰箱環(huán)境進行保存。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：反應(yīng)操作中，進一步為：在反應(yīng)器皿中加入反應(yīng)緩沖液，然后加入檢測樣本，將加入檢測樣本的反應(yīng)器皿放置到蛋白分析儀的反應(yīng)孔的對應(yīng)位置，并加入處理后的抗血清。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：所述反應(yīng)操作中，加入的反應(yīng)緩沖液、檢測樣本、處理后的抗血清的體積比為400：20：40；反應(yīng)分析進一步為：蛋白分析儀感應(yīng)到處理后的抗血清從反應(yīng)孔中加入到反應(yīng)器皿后，自動進行測試，讀取測試樣本的反應(yīng)幅度。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：所述反應(yīng)操作中，空白時間為6-8秒，反應(yīng)時間為122-124秒。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：所述蛋白分析儀采用檢測波長為650-690nm，蛋白分析儀根據(jù)空白時間讀取空白值、根據(jù)反應(yīng)時間讀出反應(yīng)幅度。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：?所述標準曲線擬合進一步包括：利用不同濃度的RANDOX的mALB校準液，定出標準曲線，對標準曲線進行非線性、多次、分段擬合。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：?所述標準曲線擬合進一步包括：檢測陡升線段或曲線，進行平滑曲線修正。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：?所述抗血清處理液：20mM，PH7.0-7.8的磷酸鹽緩沖液+150mM的NaCl溶液+40mM的Gly。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項所述的微量蛋白檢測方法，其特征在于：所述配置的反應(yīng)緩沖液：20mM，PH7.0-7.8的磷酸鹽緩沖液+30-100mM的NaCl溶液+0.01-0.5質(zhì)量百分比的魚明膠。