[發(fā)明專利]一種L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針及其應(yīng)用

無效

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• 申請日: 2012-08-17
• 公開（公告）號: CN102796516A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃珊;肖琦;蘇煒
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西師范學(xué)院
• 主分類號: C09K11/56
• 分類號: C09K11/56;G01N21/64
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務(wù)所有限責(zé)任公司 45104
• 代理人: 王素娥

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生化分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

L-半胱氨酸是一種含巰基的氨基酸，是生物體內(nèi)常見的一種氨基酸，也是構(gòu)成許多多肽和蛋白質(zhì)的主要成分之一。由于L-半胱氨酸分子結(jié)構(gòu)中的巰基具有很高的親質(zhì)子活性，且極易被氧化，從而使L-半胱氨酸具有較強(qiáng)的還原性。L-半胱氨酸在蛋白質(zhì)折疊中起十分重要的作用，可改變蛋白質(zhì)分子之間和蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的二硫鍵，減弱蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)而使蛋白質(zhì)伸展。此外，L-半胱氨酸還具有抗氧化性、解毒能力及自由基清除能力，在多種細(xì)胞活動中發(fā)揮重要的作用。L-半胱氨酸缺乏可導(dǎo)致一系列綜合病癥，如：頭發(fā)褪色、浮腫、皮膚損傷、肝臟受損等等。因此，L-半胱氨酸的檢測顯得尤為重要。到目前為止，關(guān)于L-半胱氨酸的檢測方法有分光光度法、熒光光譜法、高效液相色譜法、流動注射法、毛細(xì)管區(qū)帶電泳法及循環(huán)伏安法等。但這些方法通常分析時間較長、分析過程繁瑣，用于實(shí)際樣品測定時靈敏度較低、選擇性較差。建立簡單、快速、靈敏度高、選擇性好的L-半胱氨酸檢測方法逐漸成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。

水溶性熒光納米量子點(diǎn)作為一種新型的熒光探針，引起了多個研究領(lǐng)域內(nèi)研究人員的廣泛關(guān)注。與傳統(tǒng)的有機(jī)熒光染料和熒光蛋白相比，量子點(diǎn)具有十分優(yōu)越的光譜性質(zhì)，如：較高的量子產(chǎn)率、熒光波長可隨尺寸變化調(diào)節(jié)、寬的激發(fā)光譜、窄而對稱的發(fā)射光譜、強(qiáng)的抗光漂白性質(zhì)及較好的熒光穩(wěn)定性。這些優(yōu)越的光譜性質(zhì)使量子點(diǎn)熒光探針廣泛應(yīng)用于生化分析檢測中。在離子檢測方面，研究者們采用各種量子點(diǎn)探針進(jìn)行了一系列陰、陽離子的測定。在生物分子檢測方面，量子點(diǎn)探針也被用于尿素、葡萄糖、藥物和神經(jīng)遞質(zhì)的分析檢測中。這些結(jié)果表明量子點(diǎn)熒光納米探針在生化分析領(lǐng)域內(nèi)的巨大應(yīng)用潛力。迄今為止，研究者們僅利用L-半胱氨酸修飾和制備量子點(diǎn)，但并未采用量子點(diǎn)熒光納米探針直接檢測L-半胱氨酸。

針對以上問題，我們研究了一種熒光納米量子點(diǎn)探針檢測L-半胱氨酸的新方法，該方法操作簡單、檢測快速、靈敏度高且選擇性好，能進(jìn)行實(shí)際樣品中L-半胱氨酸的高靈敏、高選擇性識別。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種檢測L-半胱氨酸的熒光納米量子點(diǎn)探針。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針在檢測L-半胱氨酸的靈敏度和選擇性的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針為巰基乙酸修飾的熒光納米CdS量子點(diǎn)。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：

1.L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針為巰基乙酸修飾的熒光納米CdS量子點(diǎn)。制備方法如下：

在30℃的水浴中，按巰基乙酸與氯化鎘溶液的摩爾比為1∶0.05配成水溶液，攪拌60min，向溶液中加入硫化鈉溶液，使得S^2-的濃度為0.005mol/L，繼續(xù)攪拌10h，即可得巰基乙酸修飾的熒光納米CdS量子點(diǎn)，在365nm的紫外燈下，巰基乙酸修飾的熒光納米CdS量子點(diǎn)發(fā)出較弱的綠色的熒光，在400nm波長激發(fā)下，在450～650nm有很弱的熒光發(fā)射光譜。

2.L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針在檢測L-半胱氨酸的應(yīng)用。

1）L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針在檢測L-半胱氨酸的靈敏度的應(yīng)用：

應(yīng)用巰基乙酸修飾的熒光納米CdS量子點(diǎn)作為熒光探針檢測L-半胱氨酸時，將稀釋50倍后的熒光納米探針溶液與L-半胱氨酸溶液混合，使得探針與L-半胱氨酸的摩爾比為1∶1～80。在365nm的紫外燈下，有L-半胱氨酸存在時，量子點(diǎn)探針的綠色的熒光逐漸增強(qiáng)，從熒光光譜圖可得知熒光納米CdS量子點(diǎn)探針的熒光強(qiáng)度隨L-半胱氨酸的濃度的增加而增強(qiáng)，且熒光強(qiáng)度與L-半胱氨酸濃度有良好的線性關(guān)系，因此，巰基乙酸修飾的熒光納米CdS量子點(diǎn)可以作為檢測L-半胱氨酸的探針快速并定量檢測水溶液中L-半胱氨酸的含量，對L-半胱氨酸的檢測限可達(dá)到3.8nM；

2）L-半胱氨酸熒光納米量子點(diǎn)探針在檢測L-半胱氨酸的選擇性的應(yīng)用：