[發明專利]擬南芥JAV1蛋白及其編碼基因在調控植物抗病和抗蟲性中的應用

有效

• 申請號: 201210293627.1
• 申請日: 2012-08-16
• 公開（公告）號: CN103589722A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發明（設計）人: 謝道昕;胡珀;周武
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N7/01;C12N15/84;A01H5/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種擬南芥JAV1蛋白及其編碼基因在調控植物抗病和抗蟲性中的應用。

背景技術

植物在進化過程中會形成對害蟲或病原菌危害所產生的一定程度的避害、耐害或抗生的生態適應性。根據植物抗性研究開展的植物抗性基因工程是利用分子遺傳學原理，鑒定和分離抗性基因，并將抗性基因導入受體，獲得抗性穩定表達并遺傳的再生個體的生物技術。抗性基因多來自于天然的抗逆性生物，或是植物在逆境中產生的起保護作用的基因。將這些基因轉移到抗性差的品種中，就可以提高抗逆性。該技術多以過表達外源抗性基因為主，不同物種之間的差異可能會影響抗性效果。擬南芥（Arabidopsis?thaliana）隸屬被子植物門雙子葉植物綱十字花科，是現代國際和國內進行植株生物學研究的模式植物。擬南芥作為研究的模式植物得益于幾個特點：基因組小，僅有5條染色體，約24000個基因；植株小；結子多；適于人工培養。對擬南芥基因功能的深入研究將有助于作物性狀的遺傳改良。

發明內容

本發明的目的是提供擬南芥JAV1蛋白的新用途。該蛋白的氨基酸序列如序列表序列1所示，所述新用途即所述蛋白可用于調控目的植物的病害抗性和/或蟲害抗性，或調節序列表序列1所示蛋白表達量的物質或方法可用于調控目的植物的病害抗性和/或蟲害抗性。

所述病害可為傳染性病害或非傳染性病害；所述傳染性病害的生物病原物可為真菌、細菌、病毒和線蟲；所述真菌具體可為灰霉菌（Botrytis?cinerea）。

所述蟲害的致病害蟲可為夜蛾、蕈蚊或蚜蟲；

所述夜蛾具體可為甜菜夜蛾（Spodoptera?exigua）、斜紋夜蛾(Spodoptera?litura)或棉鈴蟲(Heliothis?armigera)；

所述蕈蚊具體可為遲眼蕈蚊（Bradysia?impatiens）或韭菜遲眼蕈蚊（Bradysia?odoriphage）；

所述蚜蟲具體可為桃蚜(Myzus?persicae?Sülzer)。

本發明提供一種發夾RNA，其核苷酸序列由一個莖環序列及位于所述莖環序列兩側的序列A和序列B組成，所述序列A和序列B反向互補；所述序列A為序列表序列1所示蛋白的編碼基因中200-500bp?DNA轉錄得到的RNA序列。

所述蛋白的編碼基因中的200-500bp的DNA中不含有所述蛋白的編碼基因的5’UTR區或3’UTR區序列。

所述蛋白的編碼基因具體可為序列表序列2所示的DNA分子；其中，所述5’UTR區為序列表序列2的自5’末端第1位至第259位核苷酸；所述3’UTR區為序列表序列2的自5’末端第839位至第1129位核苷酸。

所述蛋白的編碼基因中的200-500bp的DNA具體可為序列表序列2的第260-559位核苷酸序列所示的DNA。

由上述任一所述發夾RNA衍生的小干擾RNA也屬于本發明的保護范圍。

所述發夾RNA具體可為由如下序列依次相連組成的DNA片段轉錄形成的RNA：序列表序列2的第260-559位核苷酸序列、載體pTCK303的Kpn?I和Spe?I位點間的核苷酸序列和序列表序列2的第260-559位核苷酸序列的反向互補序列。

本發明提供上述任一所述RNA（發夾RNA或小干擾RNA）的編碼基因。

所述RNA的編碼基因具體為如下1）或2）的DNA分子：

1）式I所示的DNA片段，（I）SEQ_正向-X-SEQ_反向，

所述SEQ_正向是序列表序列2中包括第260位至第559位的核苷酸段，

所述SEQ_反向的序列與所述SEQ_正向的序列反向互補，

所述X是所述SEQ_正向與所述SEQ_反向之間的間隔序列，在序列上，所述X與所述SEQ_正向及所述SEQ_反向均不互補；

2）與1）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同一性且抑制序列表序列1所示蛋白表達的DNA分子。

所述SEQ_正向的核苷酸序列具體可為序列表序列2中第260位至第559位核苷酸序列。

本發明保護下述3）或4）的DNA分子：