[發(fā)明專利]一種LC-MS/MS聯(lián)用檢測(cè)卷煙主流煙氣中氨基甲酸乙酯含量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210292326.7
• 申請(qǐng)日: 2012-08-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102788858A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-11-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱懷遠(yuǎn);莊亞?wèn)|;朱瑩;張媛;張映;熊曉敏;劉獻(xiàn)軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 張文祎

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于煙草和化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙主流煙氣中氨基甲酸乙酯含量的方法。

背景技術(shù)

氨基甲酸乙酯（Ethyl?carbamate,EC又稱尿烷）廣泛存在于各種發(fā)酵食品中，是一種潛在的致癌物質(zhì)，可導(dǎo)致肺癌、淋巴癌、肝癌和皮膚癌等多種疾病,世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）將其歸為2A類致癌物，美國(guó)國(guó)家毒理計(jì)劃也將氨基甲酸乙酯列入“有理由預(yù)料引起癌癥物質(zhì)”名單，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織（FAO/WHO）食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)(JECFA)第64次會(huì)議建議,為了保障人類身體健康,應(yīng)盡可能降低發(fā)酵飲料和食品中氨基甲酸乙酯的含量。

1991年，Hoffmann公布的43種煙氣有害成分清單中，氨基甲酸乙酯名列其中，2001年Hoffmann與其研究者對(duì)1991年的有害成分清單進(jìn)行了修訂和補(bǔ)充，仍將氨基甲酸乙酯列為69種有害成分之一，2002年Rodgman和Green對(duì)煙氣中已報(bào)道的有害成分進(jìn)行了總結(jié)，也將氨基甲酸乙酯列為149種卷煙煙氣有害成分之一，美國(guó)食品及藥物管理局（FDA）將煙草中的氨基甲酸乙酯列為致癌物質(zhì)(CA)和生殖系統(tǒng)/發(fā)育有毒物(RDT)，但截至目前，尚未發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)外有采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定卷煙主流煙氣中氨基甲酸乙酯含量的任何專利和文獻(xiàn)報(bào)道。

中國(guó)專利200910099554.0公開(kāi)“一種檢測(cè)黃酒中氨基甲酸乙酯的方法”，該方法通過(guò)減壓蒸餾—與鹽酸及9-羥基噸溶液混合進(jìn)行衍生化反應(yīng)—利用高校液相色譜儀對(duì)組分進(jìn)行分離，然后采用外標(biāo)法計(jì)算氨基甲酸乙酯的含量。該方法可以有效檢測(cè)黃酒中氨基甲酸乙酯。另外中國(guó)專利201110339615.3和中國(guó)專利201110288339.2分別公開(kāi)了一種在蒸餾酒和飲料中氨基甲酸乙酯的檢測(cè)方法。

隨著公眾對(duì)吸煙與健康問(wèn)題的日益關(guān)注，卷煙煙氣有害成分—尤其是氨基甲酸乙酯的含量—成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)問(wèn)題，但是，酒類成分相對(duì)較為簡(jiǎn)單，基質(zhì)干擾較小，而煙氣的成分復(fù)雜，已經(jīng)鑒定出來(lái)的就有近5000種，且氨基甲酸乙酯在煙氣中為痕量組分，其余成分的干擾較為嚴(yán)重，上述專利方法并不適用于檢測(cè)煙氣中氨基甲酸乙酯的含量。因此，建立一種卷煙主流煙氣中氨基甲酸乙酯含量的檢測(cè)方法，并且該方法還需快速、準(zhǔn)確、分離效果好、靈敏度高是煙草行業(yè)當(dāng)前的一項(xiàng)迫切任務(wù)，對(duì)于研究和評(píng)價(jià)吸煙與健康問(wèn)題也具有十分重要和迫切的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種前處理簡(jiǎn)單、分離效果好、定性準(zhǔn)確、樣品分析時(shí)間短、檢測(cè)靈敏度高的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)卷煙主流煙氣中氨基甲酸乙酯含量的方法。

一種LC-MS/MS聯(lián)用檢測(cè)卷煙主流煙氣中氨基甲酸乙酯含量的方法，包括以下步驟：利用劍橋?yàn)V片捕集卷煙主流煙氣中的氨基甲酸乙酯，用乙醇萃取濾片，萃取液濃縮、稀釋后經(jīng)固相萃取小柱凈化，用二氯甲烷洗脫，洗脫液用高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)，采用內(nèi)標(biāo)法得到卷煙主流煙氣中氨基甲酸乙酯的含量。

進(jìn)一步地，所述內(nèi)標(biāo)法中采用的內(nèi)標(biāo)物為氘代氨基甲酸乙酯。

進(jìn)一步地，所述固相萃取小柱固定相為親水親脂平衡樹(shù)脂。例如，HLB小柱（改性的苯乙烯二乙烯基苯共聚物）。

進(jìn)一步地，所述高效液相色譜儀條件為：C18反相柱，檢測(cè)溫度30℃，進(jìn)樣量1μL～10μL，流速0.2～0.4mL/min，乙腈和水作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；所述質(zhì)譜儀條件為：離子化模式為電噴霧；掃描模式為正離子；霧化氣35～45L/min；氣簾氣10L/min；輔助加熱氣45～55L/min；碰撞氣5L/min；離子源噴射電壓5000～5800V；離子源溫度350～400℃。

進(jìn)一步地，所述高效液相色譜儀流動(dòng)相A為含0.1%乙酸的乙腈/水以V:V=90:10的混合溶液，流動(dòng)相B為乙腈；梯度洗脫程序?yàn)椋?/p>