[發(fā)明專利]針對(duì)人CD22抗體的抗獨(dú)特型抗體及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210286457.4
• 申請(qǐng)日: 2012-08-13
• 公開（公告）號(hào): CN103588882A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁瑞安
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國抗體制藥有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/42
• 分類號(hào): C07K16/42;C12N15/13;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N1/15;C12N1/13;C12N5/10;G01N33/68;G01N33/554;G01N33/53
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及針對(duì)人CD22抗體的抗獨(dú)特型抗體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

應(yīng)用單克隆抗體（MAb）進(jìn)行靶向治療并非是一種新奇或復(fù)雜的理念。然而，這一理念的實(shí)施涉及到多個(gè)學(xué)科知識(shí)技術(shù)的整合，包括抗體分子設(shè)計(jì)，細(xì)胞系優(yōu)化，產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，提純，配方優(yōu)化和各種質(zhì)控檢測，以確保所生產(chǎn)的單抗藥物能夠達(dá)到預(yù)期的臨床效果。到目前為止，已有上百個(gè)針對(duì)各種適應(yīng)癥的治療性單抗產(chǎn)品處于各個(gè)臨床試驗(yàn)階段。與之相對(duì)應(yīng)，大量基于或衍生于抗體的理念和技術(shù)手段都隨著單抗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展而日新月異，以期擴(kuò)大現(xiàn)有產(chǎn)品的應(yīng)用范圍。

其中一個(gè)衍生物基于免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說，由Niels?Jerne在1974年首先提出（參看JerneNK：1974.Ann?Immunol?125C:373-389）。Jerne提出，免疫系統(tǒng)是一個(gè)通過抗獨(dú)特型抗體互相作用來進(jìn)行調(diào)節(jié)控制免疫反應(yīng)的一個(gè)網(wǎng)絡(luò)。這一認(rèn)識(shí)后來被進(jìn)一步拓展應(yīng)用到抗獨(dú)特型抗體的其它用途。抗獨(dú)特型抗體通常也被叫做Ab2，是針對(duì)免疫抗體Ab1（即免疫系統(tǒng)針對(duì)外來抗原產(chǎn)生的抗體）并對(duì)其獨(dú)特位（抗體分子表面獨(dú)特的抗原識(shí)別簇）具有特異性識(shí)別吸附能力的抗體。Ab2可以分成三個(gè)不同的類別：1）Ab2α識(shí)別原始Ab1抗體上抗原結(jié)合部位（ABS）以外的獨(dú)特位；2）Ab2β識(shí)別抗原結(jié)合部位的位點(diǎn)并模擬其對(duì)應(yīng)空間結(jié)構(gòu)，從而形成外來抗原的“內(nèi)影像”；3）Ab2γ同樣識(shí)別抗原結(jié)合部位的位點(diǎn)，但并不對(duì)外來抗原的結(jié)構(gòu)進(jìn)行模擬。

一般認(rèn)為，最具吸引力的是Ab2抗體類型中Ab2β抗體，尤其是當(dāng)試圖用Ab2β抗體作為替代抗原發(fā)展針對(duì)自身抗原或惰性抗原的有效疫苗時(shí)，例如針對(duì)腫瘤特異抗原或腫瘤相關(guān)抗原的腫瘤疫苗，以及一些針對(duì)細(xì)菌，病毒和寄生蟲等病原體的疫苗。但是，其他類型的Ab2抗體也不可忽視，它們可以用來發(fā)展有關(guān)的檢測方法，協(xié)助具有藥用價(jià)值的治療性Ab1抗體的生產(chǎn)和臨床效價(jià)評(píng)估。

人CD22抗原在成熟或惡性B細(xì)胞表面表達(dá)(et?al.1989.Leucocyte?Typing?IV:White?cell?differentiation?antigens.New?York,Oxford?University?Press.P.63-64)。CD22是一種防止免疫系統(tǒng)過激反應(yīng)或自身免疫疾病的調(diào)節(jié)分子(Hatta?et?al.1999.Immunogenetics?49:280-286)。

SM03是由鼠源抗體RFB4衍生的一種抗CD22嵌合抗體(楊蕾等。2006。重組抗B細(xì)胞淋巴瘤嵌合抗體的構(gòu)建及鑒定。中國新藥雜志，15卷3期:186-192),并已在非何氏淋巴瘤的治療上進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段（Li?et?al.2012.Landes?BioScience?J?4(2):256-266）。由于SM03單抗以成熟B細(xì)胞為目標(biāo)并抑制其功能，這一單抗產(chǎn)品應(yīng)用已擴(kuò)展到其它自身免疫疾病適應(yīng)癥的治療，尤其是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）和系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）。

對(duì)SM03單抗運(yùn)用框架重塑技術(shù)進(jìn)行的人源化改造進(jìn)一步推進(jìn)了抗CD22抗體的應(yīng)用(梁瑞安，等。2006。應(yīng)用抗體“框架重塑”技術(shù)構(gòu)建人源化抗體fSM03。中國新藥雜志，15卷21期:1832-1836)。經(jīng)人源化改造的SM03單抗被命名為SM06。SM03和SM06針對(duì)人CD22抗原上的同一個(gè)位點(diǎn)，且具有類似的親和力。然而，在氨基酸序列和結(jié)構(gòu)上，SM03和SM06只有抗原識(shí)別部位相同，這一相同部分由它們各自的互補(bǔ)決定區(qū)（CDR）序列構(gòu)成。

SM03和SM06都能特異性識(shí)別吸附人CD22抗原，而且結(jié)合后抗體-抗原復(fù)合體會(huì)發(fā)生明顯的內(nèi)化。這一特性使得對(duì)SM03和SM06單抗產(chǎn)品的生物活性檢測變得十分困難。其它針對(duì)可內(nèi)化抗原的抗體類產(chǎn)品也有類似的困難，例如恒定鏈，CD33等等。此外，臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究需要一個(gè)方便穩(wěn)健的方法來測定游離SM03，SM06（以及RFB4）和它們的各種衍生物(scFv單鏈抗體,Fab,雙體抗體，免疫毒素，藥物結(jié)合體等等)的含量，用以評(píng)估其血清半衰期。由于可溶性游離CD22并不普遍，且外源性CD22較不穩(wěn)定，一種合適的針對(duì)SM03及其衍生物的抗獨(dú)特型抗體就顯得極具應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容