[發明專利]一種檢測乳腺癌HER2基因表達量的方法及其試劑盒有效
| 申請號： | 201210279149.9 | 申請日： | 2012-08-07 |
| 公開（公告）號： | CN102798724A | 公開（公告）日： | 2012-11-28 |
| 發明（設計）人： | 蔡林濤;盛宗海;胡德紅;龔萍;張鵬飛;高篤陽 | 申請（專利權）人： | 深圳先進技術研究院 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/577 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 518055 廣東省深圳*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 乳腺癌 her2 基因 表達 方法 及其 試劑盒 | ||
1.一種檢測乳腺癌HER2基因表達量的量子點免疫熒光試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括：
(1)抗體稀釋緩沖液；
(2)孵育緩沖液；
(3)聯吡啶釕標記的HER2單克隆抗體的溶液；
(4)無鎘量子點的水溶液；
所述的抗體稀釋緩沖液為磷酸-NaCl緩沖液；
所述的孵育緩沖液為磷酸-NaCl-胎牛血清緩沖液。
2.根據權利要求1所述的檢測乳腺癌HER2基因表達量的量子點免疫熒光試劑盒，其特征在于，所述的無鎘量子點為ZnSe/ZnS核/殼量子點。
3.根據權利要求1所述的檢測乳腺癌HER2基因表達量的量子點免疫熒光試劑盒，其特征在于，所述的抗體稀釋緩沖液中磷酸與NaCl的摩爾比為1∶1。
4.根據權利要求3所述的檢測乳腺癌HER2基因表達量的量子點免疫熒光試劑盒，其特征在于，所述的抗體稀釋緩沖液中磷酸與NaCl的濃度相同，且為0.01-0.03mol/L。
5.根據權利要求1所述的檢測乳腺癌HER2基因表達量的量子點免疫熒光試劑盒，其特征在于，所述的孵育緩沖液含有5％-20％的胎牛血清。
6.根據權利要求1所述的檢測乳腺癌HER2基因表達量的量子點免疫熒光試劑盒，其特征在于，所述的聯吡啶釕標記的HER2單克隆抗體溶液濃度為1×10-6mol/L-2×10-6mol/L。
7.一種用權利要求1所述的試劑盒檢測乳腺癌HER2基因表達量的方法，其特征在于，具體步驟如下：
(1)用抗體稀釋緩沖液稀釋聯吡啶釕標記的HER2單克隆抗體的溶液；
(2)將待測細胞加入步驟(1)得到的溶液中，再加入孵育緩沖液，室溫條件下聯吡啶釕標記的HER2單克隆抗體與待測細胞表面的HER2基因表達蛋白發生特異性的結合反應，將特異性結合反應完畢的溶液低速離心，離心后收集上清液；
(3)將步驟(2)所得上清液加入無鎘量子點的水溶液中，觀察無鎘量子點熒光，并用熒光光譜儀測定無鎘量子點熒光強度或觀察聯吡啶釕熒光，并用熒光光譜儀測定聯吡啶釕熒光強度。
8.根據權利要求7所述的試劑盒使用方法，其特征在于，所述的聯吡啶釕標記的HER2單克隆抗體與所述的無鎘量子點摩爾比為1∶20-1∶7.5。
9.根據權利要求7所述的試劑盒使用方法，其特征在于，步驟(2)中特異性的結合反應的時間為30-60min。
10.根據權利要求7所述的試劑盒使用方法，其特征在于，步驟(2)中低速離心的離心力為500-800g。
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