[發明專利]一種化學發光檢測試劑盒及制備方法

無效

• 申請號: 201210278860.2
• 申請日: 2012-08-08
• 公開（公告）號: CN102778452A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發明（設計）人: 鄒檢平
• 申請（專利權）人: 北京健平九星生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種發光檢測試劑盒，其組成為：

反應板、酶結合物、標準品、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、發光底物A、B和封板膠紙；

其中：

反應板為血管內皮細胞生長因子受體包被的固體反應板；

酶結合物為辣根過氧化物酶標記血管內皮生長因子單克隆抗體?。

2.權利要求1的試劑盒，其特征在于：

標準品為血管內皮細胞生長因子蛋白凍干粉；

樣品稀釋液為0.05%吐溫-20,?1%牛血清白蛋白，10mM乙二胺四乙酸二鈉，0.05%硫柳汞，0.4M?NaCl，pH6.5;

濃縮洗滌液為137mM?NaCl，2.7?mM?KCl,?10mM?Na₂HPO₄，2?mMKH₂PO_4?,?0.05%吐溫-20,?Ph7.4；

發光底物A、B，其中發光底物A為H₂O₂溶液，發光底物B為魯米諾溶液。

3.權利要求1的試劑盒，其特征在于，各物質的量以反應板的孔數為標準。

4.權利要求1的試劑盒，其特征在于，所述反應板為96孔。

5.上述試劑盒的制備和操作方法，主要步驟為：

（a）將血管內皮細胞生長因子受體包被于固體支持物固體反應板上；

（b）用封閉液封閉；

（c）將生物標本加入到預包被的固體反應板反應孔中，生物標本中的血管內皮細胞生長因子特異地與血管內皮細胞生長因子受體結合；

（d）用血管內皮細胞生長因子單克隆抗體檢測血管內皮細胞生長因子；

（e）發光底物為魯米諾溶液。

6.權利要求5的方法，其特征在于，步驟a所述的血管內皮細胞生長因子受體用昆蟲細胞表達。

7.權利要求5的方法，其特征在于，步驟c所述的生物標本為癌癥、血管病、糖尿病視網膜病及類風濕關節炎的血清、血漿、腦脊液、唾液、組織提取液或尿液。

8.權利要求5的方法，其特征在于，步驟d所述的血管內皮細胞生長因子單克隆抗體是用血管內皮細胞生長因子免疫小鼠所得。

9.權利要求5的方法，其特征在于，步驟d所述的單克隆抗體用辣根過氧化物酶標記。

10.權利要求6的方法，其特征在于，所述昆蟲細胞為sf9、sf12、sf158或c127細胞株。

11.權利要求6的方法，其特征在于，所述昆蟲細胞表達的血管內皮細胞生長因子受體用Ni柱純化。

12.權利要求8的方法，其特征在于，所述的血管內皮細胞生長因子用昆蟲細胞表達并用Ni柱純化。