[發明專利]一種降解辛硫磷的淡紫擬青霉菌株及其應用

無效

• 申請號: 201210276405.9
• 申請日: 2012-08-03
• 公開（公告）號: CN102796671A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發明（設計）人: 劉波;黃素芳;史懷;李芳;朱育菁;唐建陽
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院農業生物資源研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;A62D3/02;C12R1/79;A62D101/04;A62D101/28
• 代理公司: 福州市鼓樓區京華專利事務所(普通合伙) 35212
• 代理人: 宋連梅

【技術領域】

本發明涉及一種微生物及其應用，尤其涉及一種降解辛硫磷的淡紫擬青霉菌株及應用其制備辛硫磷的降解菌劑。

【背景技術】

隨著農業經濟發展，病蟲害增多，農藥用量增大，據統計，全世界每年通過植物保護方法增加的產量有80％依靠農藥。有機磷農藥一直是中國用量最大的農藥種類，每年都在十萬噸以上。但是農藥在提高農產品品質，提高人們生活質量的同時，也給人類和動物帶來了巨大的危害，同時還帶來了很大的環境污染和食品安全問題。辛硫磷是一種常用的有機磷農藥，主要用于防治地下害蟲，在土壤中的殘留時間較長，長期累積易造成環境污染。

生物修復法是利用微生物或植物或動物將土壤、地下水或海洋中的污染物降解、吸收或富集的生物工程技術。它主要可分為三種類型：植物修復技術、微生物修復技術和菌根修復技術。其中微生物修復技術是從污染土壤、水體中篩選出能降解污染物的真菌、細菌、放線菌、固氮菌、酵母菌和霉菌，通過實驗室馴化、修飾來提高其降解能力，制成菌劑再放入被污染領域中，是目前研究較多的領域。

目前據公開資料報道過的辛硫磷的降解菌主要有鄰單胞菌屬(Plesiomonas?sp.)、假單胞菌屬(Pseudomonas?sp.)、玫瑰單胞菌屬(Rosemonas?sp.)、戴爾福特菌屬（Delftia?sp．）、不動桿菌屬（Acinetobacter?sp．）、沼澤紅假單胞菌(Rhodopesudomonas?plaustris)、芽孢桿菌屬（Bacillus?spp.）、惡臭假單胞菌(Pseudomonas?putida)、蒼白桿菌屬(Ochrobactrum?sp.)，大部分處于理論研究階段，還不足以進行生產應用。將淡紫擬青霉用于對辛硫磷的降解為發明人首次報道并制備成菌劑應用于田間。

【發明內容】

本發明所要解決的技術問題在于提供一種能夠降解辛硫磷的淡紫擬青霉菌株，該菌株為淡紫擬青霉菌株FJAT-9041（Paecilomyces?lilacinus），且該淡紫擬青霉菌株FJAT-9041于2012年05月14日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏編號為CGMCC?NO．6110，并利用該菌株制備辛硫磷的降解菌劑。

本發明是通過以下技術方案解決上述技術問題的：

本申請人從福建省福州市閩侯縣的番茄根際土壤中分離得到的菌株，通過對該菌株進行病原形態學鑒定和分子生物學鑒定，最終鑒定其為淡紫擬青霉的一個菌株。

進一步地，利用該菌株制備辛硫磷的降解菌劑，其制備方法的具體步驟如下：

（1）所述的淡紫擬青霉菌株FJAT-9041的活化：用接種環將所述的淡紫擬青霉菌株FJAT-9041劃線接種于PDA平板培養基上，并于恒溫培養箱中培養48h，培養溫度設定為30℃；

（2）種子液的制備：將步驟（1）培養所獲得的淡紫擬青霉菌株FJAT-9041的單菌落接種于種子培養基中，并將其置于恒溫搖床振蕩培養，轉速200rpm，溫度設定為30℃，振蕩培養24h后即得種子液；

（3）降解菌劑的制備：將步驟（2）獲得的種子液接種到已滅菌的發酵培養基中，接種量1％，通氣量1∶1.2，溫度設定為30℃；在發酵培養的過程中每隔一段時間取適量的發酵液測定其孢子濃度，當測定的孢子濃度值達到2.0×10⁸CFU/mL時則發酵完成；然后將發酵完成后的發酵液直接以包裝瓶分裝成液體劑型，或采用泥炭吸附劑吸附后用包裝袋分裝成固體菌劑劑型。

其中，所述步驟（1）中PDA培養基的組分為：去皮馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL；

所述步驟（2）中種子培養基與步驟（3）中發酵培養基均為PDB培養基，其組分為：馬鈴薯20%，葡萄糖2％，水余量；且該培養基組分中的百分比均為重量比。

本發明的有益效果在于：提供一種淡紫擬青霉菌株FJAT-9041（Paecilomyces?lilacinus），并利用該淡紫擬青霉菌株FJAT-9041制備辛硫磷的降解菌劑，該降解菌劑對辛硫磷的降解效率很高，使用該降解菌劑可以在農作物的正常生產過程中正常使用有機磷農藥辛硫磷進行病蟲害防治而保證農產品中的農藥殘留量符合人體健康要求，另外，該降解菌劑的制備過程簡單、成本低廉、且對環境及人體無害，可進行無害化生產。

【具體實施方式】