[發(fā)明專利]移植腎排斥反應(yīng)早期診斷試劑盒及其使用方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210274357.X
• 申請日: 2011-12-23
• 公開（公告）號: CN102854323A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 石炳毅;許曉光;黃海燕
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第三〇九醫(yī)院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京元中知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11223
• 代理人: 王明霞

1.一種移植腎排斥反應(yīng)早期診斷試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括檢測移植腎排斥反應(yīng)的蛋白的抗體，所述抗體為sTNFR2、Flt3Ligand、Fractalkine、IL1ra、IL2、MDC、MIP1alpha、SDF1alphabeta、TARC、TRAIL、SCF、CCL20、MIP3alpha和XCL1Lymphotactin。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的移植腎排斥反應(yīng)早期診斷試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還含有

（1）96孔濾膜板和兩張封板膜；

（2）所述試劑盒中蛋白抗體的標(biāo)準(zhǔn)品；

（3）質(zhì)控對照；

（4）血清基質(zhì)；

（5）實驗液；

（6）洗液；

（7）藻紅蛋白-鏈霉親合素標(biāo)記抗體；

（8）珠子稀釋液；

（9）權(quán)利要求1所述的檢測移植腎排斥反應(yīng)的蛋白的抗體；

（10）預(yù)包被抗體的珠子。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的移植腎排斥反應(yīng)早期診斷試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中：

（1）所述96孔濾膜板和兩張封板膜購自Millipore公司，貨號MX-PLATE；

（2）所述標(biāo)準(zhǔn)品購自Millipore公司，貨號MXH8060,MXH8062,MXH8063,LHSP-8063和HSCR-8032；

（3）所述質(zhì)控對照購自Millipore公司，貨號為：MXH6060,MXH6062,MXH6063,LHSP-6063和HSCR-6032；

（4）所述血清基質(zhì)購自Millipore公司，貨號為：MXHSM，LHSP-SM,HSCR-SM；

（5）所述實驗液購自Millipore公司，貨號L-AB；

（6）所述洗液購自Millipore公司，貨號L-WB；

（7）所述藻紅蛋白-鏈霉親合素標(biāo)記抗體購自Millipore公司，貨號L-SAPE9，L-SAPE3,L-SAPE10,L-SAPE11,L-SAPE6；

（8）所述珠子稀釋液購自Millipore公司，貨號LBD；

（9）檢測抗體購自Millipore公司，貨號MXH1060，MXH1062，MXH1063，LHSP-1063,HSCR-1032；

（10）所述預(yù)包被抗體的珠子購自Millipore公司，貨號MXHPMX39，MXHP2PMX23,HSP，?HASP-PAI1，MXH3PMX9，HSCRPMX14。

4.權(quán)利要求1所述試劑盒的使用方法，其特征在于：

（1）采集全血，室溫靜置，1000rpm離心5~15分鐘收取上清，分裝后冷凍保存?zhèn)溆茫?/p>

（2）用實驗液或洗滌液預(yù)濕實驗板，置于振蕩器振搖5~20分鐘；吸走實驗板孔中的液體，吸干實驗板底；

（3）相應(yīng)孔分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控對照和樣品；

（4）在背景孔、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控對照孔中加入血清基質(zhì)；

（5）每孔加入珠子；

（6）封板后將實驗板振搖4℃孵育過夜或室溫下孵育0.5~2h；吸走實驗板孔中的液體，吸干實驗板底；利用洗液洗滌實驗板兩次；

（7）每孔加入相應(yīng)的檢測抗體；室溫下振搖實驗板0.5~2h；

（8）每孔加入藻紅蛋白-鏈霉親合素標(biāo)記抗體；室溫下振搖實驗板孵育20~40min；用洗液洗滌洗扳兩次；

（9）每孔加入鞘液，檢測分析得到實驗結(jié)果。