[發明專利]一種高產山梨酮的氧化葡萄糖酸桿菌工程菌及其構建方法有效
| 申請號： | 201210274174.8 | 申請日： | 2012-08-03 |
| 公開（公告）號： | CN102851252A | 公開（公告）日： | 2013-01-02 |
| 發明（設計）人： | 陳堅;周景文;高麗麗;劉杰;堵國成 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/74;C12P7/26;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀麗 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高產 山梨 氧化 葡萄糖 桿菌 工程 及其 構建 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種高產山梨酮的氧化葡萄糖酸桿菌（G.oxydans)工程菌，其特征在于通過啟動子tufB表達外源sdh基因。
2.根據權利要求1所述的工程菌，其特征在于所述sdh基因核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
3.一種促進表達生產山梨酮的質粒，其特征在于其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。
4.權利要求1所述工程菌的構建方法，其特征在于包括如下步驟：
1)設計引物分別克隆sdh和tufB；
2)將sdh、tufB克隆到重組表達載體；
3)將重組表達載體轉化到G.oxydans?621H后得到重組菌株。
5.根據權利要求4所述的構建方法，其特征在于所述重組表達載體為pBBRMCS-2。
6.權利要求1所述工程菌應用于山梨酮生產。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于將所述工程菌在30°C、200rpm培養24h后按15%的接種量接種于發酵培養基，30°C、220rpm進行搖瓶發酵，發酵周期48h。
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