[發明專利]中華鱉偽雌鱉及全雄中華鱉的培育方法

無效

• 申請號: 201210272593.8
• 申請日: 2012-07-28
• 公開（公告）號: CN102763625A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發明（設計）人: 王曉清;夏建海;熊鋼;馬曉;戴振炎
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A23K1/165;A23K1/18
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技術領域

本技術屬于水產動物遺傳育種技術領域，特別涉及中華鱉偽雌鱉(即基因型為雄性表型為雌性)的誘導方法和全雄中華鱉的培育方法，應用于鱉類性別控制和全雄苗種培育。

背景技術

中華鱉(Trionyx?sinensis)其肉味鮮美、營養豐富、滋補力強，是我國名特水產養殖動物之一。目前中華鱉養殖業迅速發展，形成了規模較大、影響力較強的特種水產養殖產業。不同性別和個體間存在著明顯的生長差異，雄性中華鱉生長顯著快于雌性，其日增重率為雌性中華鱉的1.09倍，因此全雄繁育技術是鱉產業需要解決的難題。目前，有關中華鱉性別分化的研究主要集中在環境因素的作用(聶劉旺等，2001；Ji?et?al.，2003)以及性腺發育和內分泌的研究(Lofts?B.and?Tsui?H.W.，1997；朱道玉，2009)等。中華鱉在不同季節的由腦垂體與性腺共同調節性腺和附睪性腺功能(Tsui?et?al.，1977)。在中華鱉性腺自受精卵孵化至性成熟階段中，胚胎發育至第5天形成生殖嵴；第16天原始生殖細胞開始分化，至第24-26天性腺分化結束形成精巢或卵巢(朱道玉，2009)。章龍珍等(1998)通過溫室養殖對中華鱉性腺發育的影響研究發現，溫室養殖可以使加快中華鱉性腺成熟，雌性性成熟只需21個月，雄性需10個月。在性別分化方面：Ji?et?al.(2003)等的研究顯示，中華鱉孵化溫度由24℃升高到34℃，雄鱉的比例沒有顯著差異，表明中華鱉性別決定機制中存在GSD型。孵化溫度由22℃升至35℃，雄性中華鱉的孵化比例由27.27％提高到67.57％，在一定范圍內，溫度升高會提高雄性中華鱉孵出的比例(巫旗生等，2011)，與聶劉旺的研究結果類似。葉玉珍等(1999)通過甲基睪丸素對中華鱉外部性征誘導作用的研究發現，外源雄性激素對稚鱉的外部性征及行為有較大的誘導作用。2007年，Kawai?et?al.通過基因組雜交技術發現中華鱉中存在ZZ/ZW型微小性別染色體。因此，迄今為止，通過溫度的環境因素和雌性激素誘導因素來控制中華鱉的性別，國內外尚未見報道。

發明內容

本發明是通過研究孵化溫度和17β-雌二醇對中華鱉進行性別控制，得出影響中華鱉高雌性率的孵化溫度條件和17β-雌二醇的投喂誘導濃度，建立誘導中華鱉性逆轉的技術方法，用于中華鱉性別控制和全雄中華鱉培育。

本發明的技術方案如下：

中華鱉偽雌鱉的培育方法，包括受精卵的孵化和稚鱉誘導，受精卵的孵化溫度為25℃，剛孵化出的稚鱉用17β-雌二醇進行投喂誘導而得到中華鱉偽雌鱉，17β-雌二醇投喂濃度為45mg/kg飼料(每公斤飼料中拌45mg的17β-雌二醇)，誘導時間為30天。

所述的中華鱉偽雌鱉培育方法，對稚鱉用17β-雌二醇按照45mg/kg飼料的濃度進行藥物誘導30天。

全雄中華鱉的培育方法，根據上述方法培育獲得的中華鱉偽雌鱉，再和表型、基因型均為雄性的中華鱉交配受精、人工采卵孵化，最終獲得的后代為全雄中華鱉。

本發明創新之處在于：結合了兩種影響中華鱉性別發育的外界因素，在不同階段對中華鱉進行性別控制或誘導，來提高基因型為雄性表型為雌性的偽雌中華鱉數量；并通過偽雌鱉與表型和基因型均為雄性的真雄鱉交配來得到全雄中華鱉后代。

溫控階段：本實驗設置六個孵化溫度，分別是22℃、25℃、28℃、30℃、32℃、35℃，每個指標設一個重復，每組100枚，設置一對照組，在孵化室內常溫孵化。所有卵均為同一晚產出，均重為5.1克，受精率92％。孵化基質沙粒經陽光暴曬5小時，實驗組放恒溫培養箱內孵化，孵化期間每天噴灑與砂溫度相近的水。孵化箱的相對濕度保持在85％左右，溫度由恒溫箱控制不變直至出殼。由于性別分化主要是在孵化前期進行，孵化后期最宜在正常溫度下進行，以利于稚鱉出殼生長，判斷出甲魚改變性別的關鍵時期。因此，根據中華鱉卵的孵化積溫值，25天后對在35℃、32℃、30℃、28℃下的卵移出恒溫箱至孵化室進行孵化出殼。50天后對在25℃、22℃下的卵移出恒溫箱至孵化室進行孵化出殼。

藥物誘導階段：對25℃-35℃孵化出來的稚鱉用17β-雌二醇進行誘導，將17β-雌二醇分別以30mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、65mg/kg濃度的添加量到飼料中進行投喂誘導，分別誘導30天。其余的養殖條件與稚鱉的正常培養方法一致。

本發明具有以下有益效果：

1、采用本發明的方法，可以得到較大數量的雌性中華鱉，為培育全雄中華鱉提供足夠數量的親本群。