[發明專利]一種混合(FITC/SiO2-CdTe QDs)-SiO2超級結構編碼顆粒的制備方法

有效

• 申請號: 201210269344.3
• 申請日: 2012-07-31
• 公開（公告）號: CN102807868A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 黃朝表;劉淑賢;董美婷;徐靜怡;梁孟超
• 申請（專利權）人: 浙江師范大學
• 主分類號: C09K11/88
• 分類號: C09K11/88;C09K11/06
• 代理公司: 杭州宇信知識產權代理事務所(普通合伙) 33231
• 代理人: 張宇娟

技術領域：

本發明涉及制備一種編碼納米顆粒的方法，尤其涉及一種混合(FITC/SiO₂-CdTeQDs)-SiO₂超級結構編碼顆粒的制備方法。

背景技術：

熒光編碼技術，是將兩種或多種不同顏色的熒光染料或量子點整合在微米或納米材料中，通過控制熒光物質的種類、比例和濃度來實現編碼，這些不同種類、不同比例和不同濃度的熒光物質的組合代表了不同的熒光特征，可用來標識某一特定的生命物質或事件，有望在癌癥的診斷和治療中得到應用。但在國內較多的是單一熒光元素，如單一使用有機熒光染料或直接使用多色量子點編碼，且制備條件苛刻，毒性大，表面修飾難，未有商品化的熒光編碼微球。

多重生化分析中無復雜儀器設備和過程的要求驅使了編碼熒光探針的巨大發展。有機熒光分子和量子點作為典型的熒光編碼元素，能結合在不同的納米顆粒（如SiO₂納米顆粒、聚合物納米顆粒等）上作為高質量的熒光編碼元素。有機熒光分子摻雜的納米顆粒具有改良后的高光穩定性、強熒光信號，能作為超靈敏生物檢測探針。但是，現行的幾種有機熒光分子被同一激發光激發并區分開其熒光光譜是很困難的，這也限制了有機熒光分子編碼的數量及應用。而量子點具有良好的熒光穩定性、連續的激發光譜、窄而對稱的發射光譜、可隨顆粒大小調諧的熒光發射等光學特征，是制備編碼熒光納米顆粒的理想熒光編碼元素。

二氧化硅納米顆粒(SiO₂NPs)具有制備簡單、表面光滑且透明，及生物相容性好等優點。且利用硅烷偶聯劑易對二氧化硅表面改性，可以獲得帶有氨基、巰基及羧基等不同化學基團的納米粒子，從而為二氧化硅的生物應用提供了保證。因此，將有機熒光分子和量子點組裝于功能化的二氧化硅表面可以制得發光性能優異的顆粒。通過改變編碼元素的量和顏色可以制得具有不同編碼信號的熒光納米顆粒。因此，此類具有生物相容性且發光性能優異的熒光納米顆粒在分子生物學、細胞生物學、蛋白質組學、基因組學以及高通量藥物分析等研究領域有著廣闊的應用前景。

發明內容

本發明要解決的技術問題是彌補現有技術的不足提供一種具有低毒、水溶、高生物相容等特性的(FITC/SiO₂-CdTe?QDs)-SiO₂超級結構編碼顆粒的制備方法。

為解決該技術問題，本發明采用的技術方案為：

一種混合(FITC/SiO₂-CdTe?QDs)-SiO₂超級結構編碼顆粒的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

A、CdTe量子點的制備：

稱取適量谷胱甘肽和CdCl₂·2.5H₂O溶于50mL水中，調節pH=11.0，通N₂除氧，然后加入NaHTe，確保Te和Cd的物質的量比為1︰5，95℃反應10小時，制得CdTe量子點溶液，用乙醇離心沉降得CdTe量子點顆粒，并用乙醇洗滌，真空干燥后備用。

B、表面氨基功能化的FITC/SiO₂納米顆粒的制備：

氮氣保護下，將異硫氰酸熒光素（FITC）溶于N,N′-二甲基甲酰胺（DMF）中，加入3-氨丙基三甲氧基硅烷（APTS）攪拌反應12小時，得到FITC-APTS偶合物；取一定量偶合物，加入乙醇、氨水、正硅酸乙酯（TEOS），攪拌反應24小時得到FITC/SiO₂熒光納米顆粒溶液，再加入3-氨丙基三甲氧基硅烷溶液，其中異硫氰酸熒光素、3-氨丙基三甲氧基硅烷、正硅酸乙酯、氨水、N,N′-二甲基甲酰胺和乙醇的物質的量比為2︰5︰9︰55︰143︰632，繼續攪拌反應24小時得到表面氨基功能化的FITC/SiO₂納米顆粒，離心沉降，用乙醇洗滌3-4次，干燥后備用。

C、FITC/SiO₂-CdTe?QDs顆粒的制備：

將CdTe量子點和表面氨基功能化的FITC/SiO₂納米顆粒按質量比1︰4，經1-乙基-3-（3-甲基氨基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽（EDC·HCl）脫水縮合，使CdTe量子點組裝于FITC/SiO₂納米顆粒表面，得到FITC/SiO₂-CdTe?QDs編碼顆粒前驅。