[發明專利]一種龍蝦頭中蝦青素的提取方法

無效

• 申請號: 201210269269.0
• 申請日: 2012-07-31
• 公開（公告）號: CN102746206A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 史勁松;許正宏;張超;戚善龍;施存葆;李恒;錢建瑛
• 申請（專利權）人: 揚州日興生物科技股份有限公司;江南大學
• 主分類號: C07C403/24
• 分類號: C07C403/24
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

1.一種龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

a、分離蝦黃：將龍蝦頭中的蝦黃擠出，搗爛備用；

b、酶解：用生物酶對步驟a中得到的蝦黃進行酶解，收集析出的油層；

c、萃取：將步驟b得到的油層用有機溶劑萃取，將萃取液低溫離心濃縮；

d、冷凍除雜：將步驟c中低溫離心濃縮后得到的樣品冰凍，趁冷抽濾；

e、皂化保護純化：將步驟d得到的樣品用堿的醇溶液進行皂化；

f、柱層析純化：將步驟e得到的樣品低溫離心濃縮，用聚酰胺進行純化，得到蝦青素。

2.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟b中所述生物酶為木瓜蛋白酶、風味酶或復合酶。

3.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟b中所述酶解的條件為固液比（g/ml）為:1:1~1:3，酶解溫度為47~49℃，酶解pH值5.5~6.0，水解時間60~80?min，酶與底物比為2300~2800?U/g。

4.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟c中所述有機溶劑為二氯甲烷、丙酮、乙醇、乙醚、氯仿、石油醚、乙酸乙酯或正己烷。

5.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟c中所述萃取的有機溶劑為二氯甲烷，其中，油層與二氯甲烷體積比為1:1~1:3，利用分液漏斗振蕩萃取15~25min，重復萃取2~3次，將得到萃取液合并后低溫離心濃縮。

6.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟d中將低溫離心濃縮后的樣品放入-80~-20℃條件下，趁冷抽濾。

7.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟e中所述堿的醇溶液為KOH乙醇溶液，所述KOH乙醇溶液的濃度為10-50g/L，皂化反應溫度為10-25℃，反應時間為10-40min。

8.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟f中所述聚酰胺經過預處理，所述預處理步驟為：

1)、稱取聚酰胺粉，加入無水乙醇，固液比（g/ml）為1:3~1:5，攪拌均勻，在50～60℃的溫度下保溫3~5?h，過濾，取濾渣，將所述濾渣按照上述步驟重復處理一次；

2)、將經二次乙醇處理的聚酰胺粉加正己烷，固液比（g/ml）為1:3~1:5，攪拌均勻，在50～60℃的溫度下保溫1~3?h，過濾，取濾渣，得到經過預處理的聚酰胺粉。

9.如權利要求1所述的龍蝦頭中蝦青素的提取方法，其特征在于，步驟f中，所述柱層析純化的步驟如下：

1)、稱取一定量經過預處理的聚酰胺粉于燒杯中，加入正己烷，得到聚酰胺-正己烷溶液，所述聚酰胺-正己烷溶液的固液比（g/ml）為1:1，超聲波脫氣；

2)、在空柱管中加入正己烷，再加入步驟1得到的聚酰胺-正己烷溶液，加入完畢，用洗耳球將所述聚酰胺-正己烷溶液壓緊；

3)、取皂化后得到的樣品，然后用同體積的正己烷配成溶液，將溶液加入到步驟2的空柱管中，然后依次加入正己烷、正己烷-二氯甲烷溶液、二氯甲烷進行梯度洗脫，其中正己烷-二氯甲烷溶液中正己烷與二氯甲烷的體積比為6:1，每種溶劑洗脫2~5個柱體積，洗脫液用紫外分光光度計在474nm波長下檢測，選擇有吸收的部分，即得蝦青素。