[發明專利]梅久蘭鏈霉菌ZW-1菌株及其發酵液的抑菌用途

有效

• 申請號: 201210268992.7
• 申請日: 2012-08-01
• 公開（公告）號: CN102835423A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 馬桂珍;暴增海;王淑芳;吳少杰;付泓潤;葛平華
• 申請（專利權）人: 淮海工學院
• 主分類號: A01N63/02
• 分類號: A01N63/02;A01P3/00;C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/04;C12R1/465
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 劉喜蓮

1.一種梅久蘭鏈霉菌ZW-1（Streptomyces?mediolani?strain?zw-1）及其發酵液的抑菌用途，所抑的菌為：小麥雪腐鐮刀菌（Fusarium?nivale）、小麥赤霉病菌（Fusarium?graminearum）、斑點落葉病菌（Alternaria.?alternata）、油菜菌核病菌(Sclerotinia?sclerotiorum)、菠菜早疫病菌（Alternaria?solani）、玉米圓斑病菌（Helminthosporium?carbonum）、西瓜枯萎病菌(Fusarium?oxysporum?f.sp.niveum)或者棉花枯萎病菌（Fusarium?oxysporum?f.sp.vasinfectum）。

2.根據權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的梅久蘭鏈霉菌ZW-1是通過以下方法分離得到：

（1）分離純化：從連云港海域的連島、高公島采集海水、海泥、近海土樣、海洋動、植物樣品，?25℃，180r/min富集振蕩培養5d；采用稀釋平板分離法分離放線菌，三區劃線純化后轉接到高氏一號斜面培養基上；

（2）菌株的篩選：采用平板對峙法，取直徑5mm植物病原真菌菌苔置于PDA平板中央，在真菌菌胎四周對稱位置，距離平皿邊緣15mm處劃線接種分離到的海洋放線菌不同菌株，25℃倒置恒溫培養，觀察真菌菌絲生長情況，5d后測量抑菌帶寬度，每個菌株為一處理，以不接放線菌對照，重復3次；選取一株對所述的8種植物病原真菌的抑菌帶寬度平均值大于8mm、發酵液的抑菌帶寬度高于5mm的菌株，記為ZW-1菌株；

（3）菌株的鑒定：采用插片法，將ZW-1菌株劃線接種到高氏一號培養基平板上，將滅菌的蓋玻片以45°角插入劃線接種部位的培養基內，28℃條件下分別于培養4、6、8d取出蓋玻片，觀察菌絲及孢子絲形態特征；同時進行生理生化試驗，并進行16S?rDNA?測序分析；根據形態學和生理生化試驗結果初步認為菌株ZW-1屬于鏈霉菌屬（Streptomyces）；16SrDNA的同源性分析表明,?ZW-1菌株最接近于Streptomyces?mediolani，二者的16S?rDNA?序列相似性為99?%，ZW-1菌株鑒定為梅久蘭鏈霉菌（Streptomyces?mediolani）。