[發(fā)明專利]一株解淀粉芽孢桿菌菌株的胞外多糖代謝產(chǎn)物提取及應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210268667.0
• 申請日: 2012-07-31
• 公開（公告）號: CN102816716A
• 公開（公告）日: 2012-12-12
• 發(fā)明（設計）人: 羅文娟;韓蓓;李旭;劉翠翠;韓蓁;羅國剛;張彥民
• 申請（專利權(quán)）人: 西安交通大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/04;C12R1/07
• 代理公司: 西安智大知識產(chǎn)權(quán)代理事務所 61215
• 代理人: 賀建斌

1.一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：對其16s?rRNA序列進行PCR擴增片段，測序后進行NCBI數(shù)據(jù)庫的細菌16s?rRNA序列比對，證實該分離株屬于解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens，命名為解淀粉芽孢桿菌C-1，其16s?rRNA序列NCBI登錄號為JN974457，該菌現(xiàn)保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心（CCTCC），保藏號為CCTCC?NO:M?2012177。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：產(chǎn)胞外多糖發(fā)酵、多糖的提取，G-14菌株在LB+1%葡萄糖的固體培養(yǎng)基上的菌苔呈白色、濕潤、飽滿；經(jīng)過濃縮、沉淀、除蛋白、透析后得到B.amyloliquefaciens?C-1胞外多糖提純產(chǎn)物，產(chǎn)量為380mg/L，其中的糖蛋白濃度為0.7%。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：B.amyloliquefaciens?C-1胞外多糖還原能力見表1

表1

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：B.amyloliquefaciens?C-1胞外多糖對DPPH自由基的清除作用見表2

表2

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：B.amyloliquefaciens?C-1胞外多糖對羥自由基·OH的清除作用見表3

表3

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：胞外多糖對超氧陰離子O₂^-的清除作用見表4

表4

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：脂質(zhì)過氧化抑制作用見表5

表5

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciens?C-1，其特征在于：解淀粉芽孢桿菌對人腫瘤細胞增殖的抑制結(jié)果見表6和表7

表6解淀粉芽孢桿菌提純的胞外多糖2.5mg/ml對不同人腫瘤細胞生長的抑制率%

??腫瘤細胞種類??7901??A549??7721??MCF7??7402??HELA??抑制率%??73.2??65.0??64.0??57.7??41.1??78.6

表7解淀粉芽孢桿菌胞外多糖不同濃度對腫瘤細胞7901及HELA的抑制率

??胞外多糖濃度mg/ml??0.07??0.14??0.28??0.56??1.12??2.24??對7901的抑制率%??12.99??29.47??30.32??31.32??45.11??64.60??對HELA的抑制率%??10.50??22.68??23.46??40.50??43.70??61.87