[發明專利]一種異種骨移植材料的制備方法

無效

• 申請號: 201210267323.8
• 申請日: 2012-07-31
• 公開（公告）號: CN102755665A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發明（設計）人: 陳學英;李寶興;李寶明;楊婷;張育敏;李靖
• 申請（專利權）人: 中國輻射防護研究院
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 郭海燕

技術領域

[0001]?本發明屬于醫學生物材料技術領域，具體涉及一種異種骨移植材料的制備方法。

背景技術

異種骨是采用動物源性如豬或牛等的骨組織，經過處理降低其免疫原性，用作骨移植材料，在臨床上植入患者骨缺損處，起到填充、支撐的作用，并最終改建成宿主的自身骨組織，從而達到治療的目的。

公告號為CN1456363，名稱為異種骨膠原基質制備的新方法的專利，公開了一種異種骨膠原基質制備的新方法，但該專利對異種骨膠原的制備方法未做詳述，所提到的部分脫鈣會引起骨材料的力學強度明顯下降；公告號為CN1188015，名稱為新型塊形脫脂去抗原異種骨移植材料及其制備方法的專利，采用脫脂、去抗原及部分脫鈣的方法處理異種骨，骨礦成分與膠原蛋白的含量比例約為１:１，導致所制備材料力學強度明顯下降；公告號為CN1296804，名稱為強力抗感染型重組合異種骨的制備方法的專利，采用抗菌劑與重組合異種骨復合，使材料既有骨誘導活性又有抗感染性，但重組合異種骨要復合骨形態發生蛋白，劑量難于控制，加之受體個體差異的不確定性，如果劑量過大容易誘發骨腫瘤。由此可見現有的異種骨制備方法制備過程大多比較繁瑣，或引入的化學試劑過多容易引起殘留，或清洗效果難以保證，關鍵性的，未有針對性地對異種骨材料進行病毒滅活處理，以確保移植的安全性，都難以提供一種既保留生物活性與力學強度、又安全有效的異種骨移植材料。

發明內容

本發明主要針對目前異種骨移植材料存在的制備過程繁瑣、清洗效果難以保證、化學物質引入過多易發生殘留、沒有進行病毒滅活等不足，而提供一種方法比較簡單、清洗效果好、既降低了異種骨材料的免疫原性，又能保留骨誘導活性與力學強度的異種骨移植材料的制備方法。

本發明為實現上述目的而采取的技術方案為：

一種異種骨移植材料的制備方法，包括以下步驟：

1）取材：健康合格的動物，生長6個月以上，取其髂骨與四肢長骨，即異種骨；

2）深低溫冷凍：將所取異種骨儲存于深低溫冰箱中保存；

3）成型：將深低溫冷凍后的異種骨表面軟組織剔除干凈，鋸裁成型；

4）清洗：將成型的異種骨浸于水中，超聲條件下清洗2～5次，以骨組織不顯血色為準；

5）除病毒：將步驟（4）所得異種骨，采用次氯酸鈉溶液浸泡，以滅活可能潛在的病毒，每小時換液一次，然后用水在超聲條件下清洗2～5次；

6）脫脂：將步驟（5）所得異種骨，用碳酸鈉溶液進行脫脂清洗，每小時換液一次；

7）酶處理：將脫脂后的異種骨，采用胰酶溶液處理；

8）清洗：經胰酶溶液處理的異種骨，在超聲條件下用水清洗干凈；

9）冷凍干燥：清洗干凈的異種骨，冷凍干燥至含水的質量分數為2-10%；

10）滅菌：凍干的異種骨，用不少于兩層袋包裝后，進行鈷-60?γ射線輻照滅菌。

其中所述的深低溫保存條件為-70度以下保存不少于1個月。

所述的次氯酸鈉溶液的質量分數為0.05%～5%，處理時間為0.5～16小時。?

所述的碳酸鈉溶液的質量分數為0.05%～5%，水溫35～70度，處理時間為0.5～20小時。?

所述的胰酶溶液的濃度為0.1～10g/L，水溫30～60度，處理時間為0.5～20小時。

所述的冷凍干燥至含水量為5%。

所述的鈷-60?γ射線輻照滅菌劑量為15～30kGy。

本發明與現有技術相比具有以下有益效果：

（1）本發明采用深低溫冷凍的方法保存異種骨，降低了其免疫原性；

（2）本發明采用超聲條件下清洗的辦法，提高了清洗的效率與效果；

（3）本發明采用次氯酸鈉溶液對異種骨組織進行病毒滅活，杜絕病毒傳播的可能性；

（4）本發明采用碳酸鈉溶液進行脫脂，脫脂效果好，并且不引入其它可能對人健康有影響的化學試劑；?

（5）本發明進一步采用酶處理異種骨，對其膠原結構進行切割，進一步降低其免疫原性。

附圖說明

圖1是實施例1制備的豬源性異種骨數碼照片；

圖2是實施例1制備的豬源性異種骨放大25倍的掃描電鏡圖；

圖3是實施例1制備的豬源性異種骨放大2000倍的掃描電鏡圖；

圖4是新鮮豬源性異種骨放大了200倍的光學顯微鏡圖；

圖5是實施例1制備的豬源性異種骨放大200倍的光學顯微鏡圖，