[發(fā)明專利]一種制備豬去氧膽酸的工藝

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210265456.1
• 申請(qǐng)日: 2012-07-30
• 公開（公告）號(hào): CN102775459A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈飛;胡永紅;于輝;李棟蕓;曹崢;馮旌;楊文革
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京新百藥業(yè)有限公司;南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07J9/00
• 分類號(hào): C07J9/00
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;袁正英

1.一種制備豬去氧膽酸的工藝，其具體步驟如下：

（1）鹽析：將提取膽紅素的下腳料作為原料，加入反應(yīng)釜中，再向反應(yīng)釜中加水，用酸溶液調(diào)節(jié)pH至2.0～4.0，溫度控制在15～25℃之間，邊攪拌邊加入鹽，連續(xù)攪拌，抽濾，得濾餅；

（2）堿液水解：將步驟（1）中的濾餅加入反應(yīng)釜中，再加入堿液進(jìn)行水解，水解時(shí)間為30～60min，以酸溶液酸化至剛果紅變藍(lán)，靜置，抽濾，得到濾餅；

（3）吸附脫色：將步驟（2）中得到的濾餅加入反應(yīng)釜中，再向反應(yīng)釜中加入有機(jī)溶劑和活性炭，加熱至65～80℃，冷凝回流30～60min；冷卻至20～30℃，抽濾，得濾液，向?yàn)V液中加入脫水劑，脫水15～24h；抽濾，濾液旋蒸，濃縮至原體積的1/3～2/3，靜置結(jié)晶，過濾收集晶體，真空干燥，得到豬去氧膽酸粗品；

（4）甲酯化：取豬去氧膽酸粗品溶于有機(jī)溶劑中，加入濃硫酸進(jìn)行酯化，于15～25℃下攪拌36～48h，調(diào)節(jié)pH至6.8～7.2，繼續(xù)攪拌1～2h；進(jìn)行抽濾，濾餅用有機(jī)溶劑洗滌2～3次，合并濾液及洗液，減壓蒸去有機(jī)溶劑，得到棕色粘稠狀物；并經(jīng)過TLC監(jiān)測(cè)；

（5）柱層析：濕法裝柱；將步驟（4）中所得棕色粘稠狀物加入硅膠柱中；用洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液，經(jīng)過TLC監(jiān)測(cè)；再進(jìn)行減壓濃縮，得到淡黃色粘稠狀固體；

（6）水解：將步驟（5）所得淡黃色粘稠狀固體加入反應(yīng)釜中，加入堿和水，用酸溶液調(diào)節(jié)pH至剛果紅變藍(lán)，抽濾，收集沉淀，水洗至流出液無(wú)色，得豬去氧膽酸；

（7）純化：將步驟（6）所得豬去氧膽酸加入有機(jī)溶劑中，在機(jī)械攪拌條件下加熱至有機(jī)溶劑水溶液完全沸騰，待豬去氧膽酸溶解后，分次加入水，繼續(xù)攪拌，待溫度降至10～20℃，再機(jī)械攪拌30～60min，進(jìn)行抽濾，得到豬去氧膽酸晶體；

（8）真空干燥：將步驟（7）中的晶體用恒溫真空度干燥箱進(jìn)行干燥，即得豬去氧膽酸純品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（1）中所述的水的用量為3～6mL/g原料量；調(diào)節(jié)pH所用的酸溶液為HCl或H₂SO₄溶液；所用鹽為NaCl或者Na₂SO₄，鹽的用量為0.3～0.4g/mL水的用量；連續(xù)攪拌的時(shí)間為30～60min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（2）中所述堿液為NaOH或KOH的水溶液，濃度為0.35～0.45g/mL，用量為2～3mL/g濕濾餅的量；酸化所用酸溶液為HCl或H₂SO₄溶液；靜置時(shí)間為1～2h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（3）中所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯或丙酮，有機(jī)溶劑的用量為3～5mL/g濾餅量；活性炭和濾餅的質(zhì)量比為0.06～0.09：1；脫水劑為無(wú)水硫酸鈉或無(wú)水硫酸鎂，脫水劑的用量為0.2～0.3g/mL有機(jī)溶劑的量。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（3）和（8）中所述的真空干燥箱的溫度均為60～80℃；真空度均為-0.075～-0.01MPa；干燥時(shí)間均為12～24小時(shí)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（4）中溶解豬去氧膽酸粗品的有機(jī)溶劑和洗滌濾餅所用的有機(jī)溶劑均為甲醇或乙醇；溶解豬去氧膽酸粗品所用的有機(jī)溶劑量為5～8mL/g豬去氧膽酸粗品量；濃硫酸的濃度為96%～99%，用量為0.05～0.15mL/g豬去氧膽酸粗品量；用來(lái)調(diào)節(jié)pH的是無(wú)水NaHCO₃；TLC監(jiān)測(cè)過程中所用的展開劑為V_乙酸乙酯：V_石油醚：V_甲酸=4.8～5.2：4.8～5.2：0.8～1.2，0.9～1.0%磷鉬酸乙醇溶液顯色。