[發(fā)明專利]一種棉花纖維中單寧的提取及含量檢測的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210265375.1
• 申請日: 2012-07-27
• 公開（公告）號: CN102759469A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊偉華;郁有祝;郭玉華;許紅霞;王延琴;周大云;匡猛;馮新愛;方丹
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N21/31
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，具體為一種棉花纖維中的單寧的提取和檢測的方法。

背景技術(shù)

單寧是棉花植株內(nèi)一種重要的次生物質(zhì)，是一類包括縮合及水解單寧在內(nèi)的黃酮類化合物，它對棉鈴蟲、黃萎病在內(nèi)的所有主要病蟲害都有一定的抗性作用，為此近年來倍受關(guān)注。

對于棉花植株中單寧含量的測定已有報道，如我國學(xué)者、國外學(xué)者Hedin等(1992年)測定了一些陸地棉和亞洲棉品種的黃酮類化合物在棉株上的分布結(jié)果表明，在陸地棉中葉、蕾、鈴的含量依次為4.38％、2.12％和2.09％；在亞洲棉中葉、蕾、鈴的含量依次為2.18％、2.37％和4.55％。武予清等采用正丁醇鹽酸法和香草醛法測定了棉花植株中各個組織縮合單寧的含量，花萼、鈴皮和葉片縮合單寧含量較高（5％~10％），花瓣、花柱子房和鈴心中含量較低（2％左右），但對于成熟棉花纖維中單寧提取及含量測定尚未報道。

因此，提出一種成熟棉花纖維中單寧提取及含量測定的簡單、準(zhǔn)確的方法，對于監(jiān)測貯存過程中棉花纖維中單寧含量的變化、控制棉花品級與品質(zhì)下降具有重要意義。本發(fā)明的發(fā)明人在工作實踐中，進(jìn)行了大量的試驗與比較研究，從單寧提取最佳條件的選擇到FoLin酚還原法檢測單寧含量方法的建立都進(jìn)行了非常詳細(xì)認(rèn)真的試驗研究，并提出一種棉花纖維中的單寧的提取和檢測的方法。

發(fā)明內(nèi)容

針對本領(lǐng)域研究方面之不足，本發(fā)明的目的是提出一種棉花纖維中單寧的提取方法。

本發(fā)明的另一目的是提出一種棉花纖維中單寧的含量檢測方法。

實現(xiàn)本發(fā)明目的的具體技術(shù)方案為：

一種棉花纖維中單寧的提取方法，其提取步驟包括：向棉花纖維樣品中加入丙酮溶液使棉花纖維充分浸透，加熱同時冷凝回流，然后冷卻至室溫。

其中，所述丙酮溶液為體積比1:0.5-2的丙酮水溶液。

其中，所加丙酮溶液的量為每克棉花纖維樣品中加入丙酮溶液5-25mL，優(yōu)選12-18mL。

其中，所述加熱冷凝回流的溫度為65-95℃，優(yōu)選為85℃。

其中，所述加熱同時冷凝回流的時間為15-90min，優(yōu)選為60min。在優(yōu)選的提取用丙酮用量及加熱冷凝回流的溫度、時間條件下提出的單寧含量最高。

一種棉花纖維中單寧的含量檢測方法，是使用本發(fā)明所提出的方法得到棉花纖維的單寧提取液，向提取液中加入F-D試劑（Folin-Denis試劑，又稱佛丹二氏試劑）和飽和碳酸鈉，靜置，在750-780nm波長下測定吸光度。

其中，所述單寧提取液與F-D試劑的體積比為:1:0.5-2.5，優(yōu)選為1：0.6。

其中，所述飽和碳酸鈉與單寧提取液的體積比為1:0-2.5，優(yōu)選1：1.4。

其中，所述靜置的時間為5-50min，優(yōu)選為25min。優(yōu)選的提取液與F-D試劑的體積比、靜置時間條件下，顯色測得的吸光度值最大，從而測得的單寧含量最高。

本發(fā)明的優(yōu)良效果在于：

通過考察影響單寧提取率的三個因素（提取液用量、提取溫度、提取時間）和FoLin酚還原法檢測單寧含量的影響因素（F-D試劑的用量、飽和Na₂CO₃用量、顯色時間），建立了一種適用于棉花纖維中單寧提取及含量檢測的方法，用該方法對實際棉花樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，而且該方法經(jīng)濟(jì)簡單、快速易行。

附圖說明

圖1為單寧酸溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

具體實施方式

以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

實驗例：提取和檢測條件的比較和選擇

1）單寧提取條件（丙酮溶液用量）的比較和選擇步驟為：稱取2±0.5g棉花纖維5份，分別放入100mL燒瓶中，向燒瓶中依次加入1:1丙酮溶液10mL、20mL、24mL、30mL、36mL、40mL、50mL，并用玻璃棒將棉花纖維全部浸透，在85℃水浴中加熱60min同時冷凝回流，冷卻至室溫，得提取液。依次從燒瓶中吸取1mL提取液加入盛有約6mL水的10mL試管中，搖勻。分別加F-D試劑0.6mL，搖勻，加飽和Na₂CO₃溶液1.4mL，定容搖勻，靜置30min后在760nm處測其吸光度。加入1:1丙酮溶液10mL、20mL、24mL、30mL、36mL、40mL、50mL測得的吸光度分別為0.187、0.226、0.282、0.358、0.259、0.132、0.113，其中最大值為加入丙酮溶液為24-36ml的樣品的吸光度值。