[發明專利]基于茜素染料的α-D-N-乙酰神經氨酸苷化合物及其制備方法與應用

無效

• 申請號: 201210263118.4
• 申請日: 2012-07-27
• 公開（公告）號: CN102796151A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發明（設計）人: 林華青
• 申請（專利權）人: 珠海迪爾生物工程有限公司
• 主分類號: C07H15/244
• 分類號: C07H15/244;C07H1/00;C12Q1/34;C12Q1/04
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 譚志強

技術領域

本發明屬于醫學檢驗領域，具體涉及一種新的化合物：基于茜素染料的α-D-N-乙酰神經氨酸苷及其鹽，其制備方法，以及其在制備細菌性陰道病檢測試劑盒上的應用。

背景技術

細菌性陰道病(Bacterial?Vaginosis，簡稱BV)是由于細菌過度生長所致陰道微生態的非正常改變，從而導致的一類多微生物病。以前曾命名為非特異性陰道炎、加特納菌性陰道炎、厭氧菌性陰道炎、嗜血桿菌性陰道炎、棒狀桿菌陰道炎等。直到1984年，在瑞典國際會議上才正式命名為“細菌性陰道病”。BV?是最常見的婦產科疾病之一，通過對患有BV?的婦女的陰道分泌物進行培養后發現，BV?患者陰道中分離到的菌種大約是健康婦女陰道中分離到菌種的兩倍，其中普沃氏菌屬、卟啉單胞菌屬、消化鏈球菌屬、動彎桿菌屬、陰道加特納菌屬、和不產H₂O₂的乳桿菌，都與BV有密切關系；而在健康婦女陰道中大量增養出的是產H₂O₂的乳桿菌，由此可推斷產H₂O₂的乳桿菌可以抑制BV相關細菌的活性。

細菌性陰道病是婦產科最常見的疾病之一，感染率在15%～50%，且易復發。患BV的婦女中有50%的人易早產或分娩低體重兒，她們所生下的孩子也很可能會因此帶有各種后遺癥。越來越多的證據表明，BV是導致組織性絨毛膜炎、羊水感染、剖腹產術后子宮內膜炎及其他妊娠不良和妊娠并發癥的危險因素。另外在婦科中，BV主要與輸卵管炎、盆腔炎、宮外孕、不孕癥、泌尿系感染、術后感染及婦科腫瘤有關。因此，細菌性陰道病的檢測就顯得尤為重要。

1984年Amsel提出診斷BV的標準，即符合以下4項指標中的3項可診斷為BV：(1)陰道pH＞4.5；(2)陰道分泌物增多，變稀如奶狀，有異味；(3)胺試驗(Whiff)陽性，即在陰道分泌物中加入10%?KOH產生魚腥味；(4)陰道涂片中可見線索細胞。這四項診斷指標，后來被稱為BV診斷“金標準”。然而要在實際中準確實施并非易事。首先，一些與感染無關的因素如近期性交、陰道灌洗、行經或是存在大量子宮頸粘液等同樣可以導致陰道pH值升高，或使分泌產生異味；胺試驗中對氣味的鑒別因人而異；而對于作BV診斷最佳標志的線索細胞的識別則受到顯微設備的質量、樣本的采集以及操作者的經驗等諸多因素的共同影響，主觀性強，因而很難對判定結果進行統計和比較。80年代后期，人們發現了BV與陰道中特有的微生物有關，并依此研究出一系列新的BV診斷技術和方法，包括陰道分泌物培養、革蘭染色方法和脫落細胞巴氏染色法。但這些方法敏感度均不甚理想，在實際臨床應用中依賴于操作者的經驗以及熟練程度。

隨著對BV發病機制的不斷深入了解，產生了以檢測BV患者陰道分泌物中所特有的微生物的代謝產物為基礎的生化診斷方法。這些方法具有優于上述各方法的特性，客觀且適于批量操作，最常見的是陰道分泌物中致病菌的酶活性檢測。大量研究都已證實，陰道分泌物中唾液酸酶含量及活性高低與細菌性陰道病之間存在較好的正相關性，BV患者的陰道分泌物中有產生唾液酸酶的細菌存在，非BV患者的陰道分泌物中則幾乎不顯示異常的唾液酸酶活性。2000年，美國FDA批準了Gryphus?Diagnostics公司的BVBlue試劑盒，該試劑盒采用唾液酸酶（也稱為神經氨酸酶）專利底物，特異性檢測BV患者陰道分泌物中唾液酸酶活性。US6512100公開了BVBlue試劑盒專利顯色底物，其顯色基團需在堿性溶液中才能發生顏色改變。該專利還公開了一種基于吲哚基團的神經氨酸苷，其中5-溴-4-氯-3-吲哚顯色基團已廣泛應用在多種臨床病原菌的顯色培養方面，如專利US6051391、US6068988、US6416970等就公開了這方面的臨床應用。國內公開號CN200510053328、CN200610056827、CN200910037435、CN201010100450、CN201010285203、CN201020511784、CN201110174158等都采用了5-溴-4-氯-3-吲哚神經氨酸苷作為顯色底物來檢測唾液酸酶活性，同時基本都采用重氮鹽與顯色基團反應，以加快反應速度和提高反應靈敏度。上述唾液酸酶底物，都是國外專利產品，合成難度較大，價格昂貴。

發明內容

本發明的一個目的在于提供一種新的化合物：基于茜素染料的α-D-N-乙酰神經氨酸苷或其鹽。

本發明的另一個目的在于提供基于茜素染料的α-D-N-乙酰神經氨酸苷或其鹽的制備方法。

本發明的另一個目的在于提供一種細菌性陰道病檢測試劑盒。